高效液相色谱法测定西替利嗪二盐酸口服液和片剂中的西替利嗪有关物质和防腐剂.docVIP

译文 高效液相色谱法测定西替利嗪二盐酸口服液和片剂中的西替利嗪、有关物质和防腐剂 摘要 建立了一种有效的高效液相色谱法检测市售西替利嗪(CZ)口服液和片剂中西替利嗪和有关物质。此外，该方法也适用于药物制剂中两种防腐剂，即对羟基苯甲酸丙酯(PP)，对羟基苯甲酸丁酯(BP)的测定。色谱分析系统由Hypersil BDS C-18（4.6×250mm，5μm）色谱柱，检测波长230nm，流动相为0.05M的二氢磷酸盐(pH5.5)：乙腈：甲醇：四氢呋喃（12:5:2:1，v/v/v/v）,流速1mL/min。线性曲线范围，西替利嗪200-800μg/mL到1-4μg/mL之间，防腐剂20-100μg/mL，与西替利嗪有关物质1-4μg/mL。CZ的检测限（LOD）和定量限（LOQ）分别为0.1和0.3μg/mL，CZ有关物质的LOD和LOQ范围分别是0.08-0.26μg/mL和0.28-0.86μg/mL.该方法对CZ和其有关物质的分析经验证专属性强稳定，可供欧洲药典方法系统选择。 关键词：西替利嗪，HPLC，防腐剂，稳定性，杂质 简介 盐酸西替利嗪（CZ）化学名是：（±）-2-[2-[4-[（4-氯苯基）苯甲基]-1-哌嗪基]乙氧基]乙酸二盐酸盐 CZ有关物质的初步测定：采用250×4.6mm色谱柱，填充物为5 μm硅胶，流动相是稀硫酸：水：乙腈（0.4:6.6:93，v/v/v)混合液，流速1mL/min,检测波长230nm。该方法在应用中由于流动相pH值（0.5)低，可能导致色谱柱损坏，柱效降低，一般重复使用2-3次就需更换新柱，以保证试验参数的准确性。同时，杂质A和F以及非药典规定的杂质H和I之间有相互干扰。 目前，还有另一种方法可以检测欧洲药典中提到的8种杂质中除杂质C其它所有杂质的方法。这种方法基于LC/MS技术，由含氰基的色谱柱和电喷雾电离质谱组成，50毫摩尔的醋酸铵溶液（pH7)和乙腈组成的二元梯度洗脱体系。这种使用昂贵的MS检测技术和梯度洗脱体系的方法仅应用于片剂的分析。 因此，本研究旨在建立一个简单的应用等度洗脱系统和常用的紫外检测器的高效液相色谱法，同时测定无论是固体还是液体制剂中CZ及其有关物质的含量。另外，该方法同样适用于检测液体制剂中与其它药物成分在一起的两种防腐剂 - PP和BP。 试验 2.1.材料和仪器 CZ与CZ有关物质（A-I），PP，BP标准品，Cetolerg片（5，10mg），Cetolerg溶液剂（1和10mg/mL)和赋形剂由Jordanian pHarmaceutical Manu-facturing Company (JPM)提供。 Zyretic 片和 Zyretic 液从约旦市场购得，其它与HPLC分析相关的化学物质从威百灵公司获得。色谱系统由装有Hypersil BDS C18柱（5μm，4.6×250mm）的HPLC（高效液相色谱仪P1000，紫外检测器1000）构成。 2.2.分析方法 2.2.1.流动相 流动相经脱气过滤，pH值约为5.5。流动相组成为磷酸二氢钾（0.05M）：乙腈：甲醇：四氢呋喃（60：25:10:5,v/v/v/v)。 2.2.2.标准溶液 精密称取50mgCZ，溶入100mL的的流动相中，然后稀释得到CZ的标准储备液。防腐剂的标准储备液用溶解法配制：精密称取40mg的PP和BP放入200mL的流动相中，用流动相稀释5倍。CZ有关物质：准确称取每种杂质对照品各5mg，溶解在200mL的流动相中，稀释10倍。 2.2.3.药物基质制备 药物基质使用的材料有：PP、BP、丙二醇、丙三醇、冰醋酸、醋酸钠、糖精钠、羟甲基纤维素钠、青梅香精、净化水。当分析防腐剂时，将PP和PB替换成CZ。CZ片的药物基质由混合微晶纤维素、乳糖、硬脂酸镁、欧巴代包衣材料制成。 2.2.4.溶液稳定性和专一性的测定 用0.1M的HCl、0.1M的NaOH和1％H2O2溶液诱导CZ和防腐剂降解。取250mgCZ，80mgPP，80mgBP分别溶于100mL的3种降解溶液中，在80°C环境下放置10小时。然后每种溶液各取10mL分别用流动相稀释至50mL。 光照对CZ固体和溶液稳定性影响的研究：把CZ的粉末（在培养皿中薄铺一层）和溶液（200μg/mL）分别暴露在低强度紫外光和日光下各65天和2天。 2.2.5.溶液线性范围的测定 精密称取的CZ（20-80mg）用于测定标准溶液的线性，分别溶于100mL的流动相中，制得标准溶液。然后，稀释，配制1-4μg/mL的系列溶液。CZ有关物质制备：每个组分精密称取5mg，溶解在200mL的流动相中，稀释得到浓度范围1-4μg/mL的溶液。防腐剂溶液的制备：精密称取40mgPP、BP溶解在100mL的流动相中，用流动相稀释为浓度范围是20-