CXW倒置显微镜使用培训 [兼容模式].pdf

科科研研实实验验中中心心 2015春_ 倒置显微镜使用培训CXY 李敏惠 主要内容 显微镜基础知识 IX71IX71结结构构介介绍绍 IX71操作规程 操作注意事项 常见问题及处理 （1）正置显微镜;（2）倒置显微镜;（3）体式显微镜。 MOTIC AE2000 NIKON TS100 OLYMPUS IX71 OLYMPUS IX71倒置相差荧光显微镜 原理 倒置显微镜系统 （IX7系列）是在透镜成像原理 基础上发展起来的显微观察系统，利用卤素灯为 光光源源，，光光线线经经过过聚聚光光镜镜汇汇聚聚后后透透过过标标本本，，通通过过物物 镜对标本进行聚焦放大成像，最后通过目镜把物 镜所成的像再次放大，从而使实验者能够清晰的 分辨体外培养的细胞的形态以及内部结构。 主要用于体外活细胞培养形态观察，根据实验需 求配置了明场、相差、荧光等技术模块。 倒置相差荧光显微镜 优点：光路长、工 作距离长、可以观 察察培培养养瓶瓶等等；； 明场BF、相差PH、 荧光FL。 IX71 结构简介 光路 普通 荧光 光光源源 光光源源 开关 光强 卤素灯泡 滤光片 视场光栅 聚光镜 孔径光栅 相差环 载物台 物镜 物镜规格 4X 10X 20X 40X 相差环 观察相差时，要使用与相 差物镜放大倍数相匹配的 相差环。 对应相差环选择： 相差元件 （ PHL PH 1 （PH C） PH 2 聚光镜内） 物镜 4倍 10倍、20倍 40倍 物镜 明场观察，选择BF 物镜转换器 目镜 光路选择钮 限位杆 锁定粗准焦，控制物镜升降。 操作规程 转动荧光分光镜组件转盘选择光路。 透射光观察时，转动未装激发块的荧光转盘部位进入光 路，使透射光接入光路。 荧荧光光转转盘盘的的选选择择：：在在物物镜镜下下方方的的荧荧光光转转盘盘里里装装有有不不同同的的 滤色块，对应的标记在机架前方可以看见，针对不一样 的荧光染料选用不一样的滤色镜块。WB ：蓝色激发/ 绿 色荧光 （例：FITC、EGFP等）；WIG ：绿色激发/ 红色 荧光 （例：Rhodamine、DsRed等）。 选择滤色片： 在出光口有4个滤色片，包括2个光强调节滤色片 （ND25/6 ，透过率25%/6%），1个绿色单色反差滤色片，1个毛玻璃 ，，其其中中毛毛玻玻璃璃一一直直选选用用，，当当光光强强比比较较强强的的时时候候，，可可以以选选择择不不 同的光强调节滤色片来减弱，在做相差观察的时候可以选择 绿色滤色片 （可以增加反差效果）。 荧光观察时，使用高倍物镜长时间观察，会发生荧光衰减， 导致荧光图像反差减弱，这时可以选择ND滤色片减少激发 光强 （本机现在无配备）。 样品聚焦： 调节粗/微调焦旋钮 调节光强调节钮 调节双目观察筒 调节瞳间距 调节屈光度。转动左目镜筒上的屈光度调节环，直 到视场周边区域清晰可见。 利用X 轴Y轴调节钮调节样品位置。 物镜调节： 变倍钮 调节物镜转换器选择放大倍数；光路转换，用相差环选择 （ 观察）光路。做明场观察的时候选用B