CTCF是一种细胞类型特异性表达的核内定位蛋白因子.pdfVIP

·146· ·论著· CTCF是一种细胞类型特异性表达的 核内定位蛋白因子 任立成 王洋 师明磊 马骊 杨忠 王小宁 赵志虎 目的 factor，CTCF)在细胞核内的定位 【摘要】 探讨CCCTC结合因子(CCCTC-binding 以及该基因表达水平的细胞类型特异性。方法 通过蛋白质印迹技术对乳腺癌细胞MCF-7 的不同细胞组分中CTCF蛋白的含量进行了分析；应用蛋白质免疫荧光技术，通过共聚焦显 微镜分析系统对CTCF在MCF-7单细胞中的定位进行了分析；然后通过蛋白质印迹技术和 RT．qPCR技术分别对CTCF在正常外周血白细胞、MCF-7以及淋巴瘤细胞Jurkat和namos等不 同类型细胞中的表达水平进行了分析。结果 蛋白质印迹和蛋白质免疫荧光技术的分析结 果表明CTCF主要分布在细胞核内。蛋白质印迹和RT—qPCR技术的分析结果表明CTCF在这 些不同细胞类型中的表达水平各不相同，与正常细胞相比较，CTCF在肿瘤细胞中的表达水平 明显增高；在不同类型的肿瘤细胞中的表达水平也存在着很大的差异性。结论 CTCF是一 种细胞核内特异定位的蛋白因子，CTCF的表达水平具有细胞类型特异性。 【关键词】 CCCTC结合因子；蛋白免疫印迹分析； 核定位蛋白； 免疫荧光 CTCFisa andnuclei-locatedfactor cell-孵specificexpression protein Zhi—hu REN丘一如昭‘，WANGYang，Sill施昭一lei，MALi，YANGZhong，WANGXiao—ning，ZHAO Bioreactor China Sci- (+StateKeyLaboratoryof Engineering，SchoolofBiotechnology，EastUniversityof eil虻eand 200237，China) Technology，Shanghai o埘幻r：WANG Corresponding Xiao-ning．E—mail：xnwan988@gmail．COIn To thedistributionof cell 【Abstract】Objective factor(CTCF)in investigate CCCTC-binding nucleolusandthe levelsofthe indifferentcelllines．Methods cell—typespecifcexpression gene Using theWestern—blot distributionofCTCFintheMCF-7cellswas thelocation technique，the analyzed．And ofCTCFinthe MCF·7cell was theconfocallaser single spaceanalyzedusing scanningmicroscope诵tll immunofluorescencethe RT—PCRandWestern-blot CTCFex- the technique．Withquantitative asses，the in celllinesofthenormal whiteblood levels·werede