2012年同等学力研究生复习分子生物学.pptVIP

* 基因重组的概念、过程、应用。 [概念]：①克隆与克隆化：同一母本的所有副本或拷贝的集合，获取同一拷贝的过程克隆化。②基因工程。③工具酶。④载体。⑤PCR。⑥cDNA文库。⑦基因组文库。 [过程]：①基因的获取。②载体选构。③基因与载体的连接。④重组子转入。⑤筛选转化子。⑥目的基因的表达。（分、切、接、转、筛、表） [应用]：①发现致病基因。②发展新药。③DNA诊断。④基因治疗。⑤遗传病防治。 * 基因组(genome) 泛指一个有生命体、病毒或细胞器的全部遗传物质；在真核生物，基因组是指一套染色体（单倍体）DNA。 基因组学概念 基因组学(genomics) 就是发展和应用DNA制图、测序新技术以及计算机程序，分析生命体（包括人类）全部基因组结构及功能。包括结构基因组，功能基因组学，比较基因组学3个亚领域。 * ?基因表达调控的基本控制点是： A.基因结构活化 B.转录起始 C.转录后加工 D.蛋白质翻译及翻译后加工 E. mRNA从细胞核转运到细胞浆 [评析]： 本题考点：基因表达调控特点 特异基因的表达受多级调控，它包括复制水平，转录起始，转录后加工和蛋白质翻译及翻译后加工的调节。但调控基因表达开、关的关键机制主要发生在转录起始。 A型题 35 ．基因启动子是指A ．编码mRNA 的DNA 序列的第一个外显子B ．开始转录生成mRNA 的那段DNA 序列C ．阻遏蛋白结合的DNA 序列D . RNA 聚合酶最初与DNA 结合的那段DNA 序列 * 38．下列关于真核基因组结构特点的叙述．错误的是 A．基因不连续 B．基因组结构庞大 C．含大量重复序列 D．转录产物为多顺反子 【分析】 本题旨在考查考生对真核基因组结构的掌握程度。真核基因组结构特点是基因组结构庞大，含大量重复序列，基因属于断裂基因，不连续。转录产物为单顺反子。故正确答案是D。 2.基因组是指A以转录组学为基础的研究领域B一种生物体具有的所有遗传信息的总和C 研究基因的结构,功能及表达产物的学科领域D 包括转录组学和蛋白质组学等内容的科学领域 * B型题 A．Klenow片段 B． 连接酶 C．碱性磷酸酶 D．末端转移酶 127．常用于合成cDNA第二链的酶是 A 128． 常用于标记双链DNA 3 ′端的酶是 A 【分析】 l27、128题旨在考查考生对重组DNA技术相关概念的掌握程度。在DNA重组技术中，Klenow片段作为DNA聚合酶，常用于合成cDNA第二链和标记双链DNA 3’端，连接酶常用于两个DNA分子或片段的连接，碱性磷酸酶常用于切除DNA末端磷酸基，而末端转移酶是在3’羟基末端进行同质多聚物加尾。故l27、128题的正确答案均是A。 * A．CAP结合位点 B．启动序列 C．操纵序列 D．结构基因编码序列 131．分解(代谢)物激活蛋白在DNA的结合部位是 A 132．阻遏蛋白在DNA的结合部位是 C 【分析】 本题旨在考查考生对原核生物乳糖操纵子结构的掌握程度。乳糖操纵子的结构由结构基因(Z、Y和A)、操纵序列、启动序列和调节基因I组成。其中结构基因编码乳糖代谢的酶，调节基因I编码阻遏蛋白，阻遏蛋白与操纵序列结合，关闭操纵子，RNA聚合酶与启动序列结合。在启动序列上游还有分解(代谢)物激活蛋白(catabolite gene activator protein，CAP)结合位点，与cAMP-CAP结合，正向调控乳糖操纵子。故l31题正确答案是A，132题正确答案是C。 * X型题 161、重组DNA技术中，可用于获取目的基因的方法有：A、化学合成B、PCR (应用最多的) C、DNA文库 D、基因敲除 * * 起始阶段（以原核为例）： 转录空泡：也称为转录复合物，就是RNA的核心酶、DNA模板和转录产物RNA三者结合在一起的复合体 与DNA复制不同的是，RNA合成不需引物。 σ因子必需脱落，否则核心酶不滑动，RNA链不能延长。 ?因子可再次与核心酶结合，循环使用。 终止信号特点： 终止部位连续的U之前含GC富集区与AT富集区,形成发卡结构，以终止转录。 蛋白?因子参与终止：辅助识别终止信号；诱使RNA聚合酶构象改变停止滑动; ?因子的解螺旋酶活性使RNA产物释放。 延长阶段 终止阶段 一 信使RNA（m