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输血相容性检测中的对照实验2
输血相容性检测中的 对照实验 甘 佳 DTM@PUMCH 输血医学 与血液/血液成分输注有关的医学分支 血液/血液成分捐献 免疫血液学/分子生物学/其它实验室技术 临床输血实践 治疗性血液成分单采 干细胞采集 细胞治疗 出凝血管理 …… DTM@PUMCH 输血医学的发展 从临床实践来 血型、采集/保存/输注、输血不良反应…… 回归到临床实践 利 弊 DTM@PUMCH 免疫血液学 血液学的分支 抗原-抗体 血液系统疾病病因/ 临床表现 DTM@PUMCH 免疫血液学技术 血清学技术 凝集、沉淀、中和、补体结合 免疫标记技术 酶、荧光、同位素… 抗原多态性-表型 功能 分子基础 DTM@PUMCH 凝集反应 颗粒性抗原与相应抗体特异性结合,出现 肉眼可见的凝集现象 DTM@PUMCH 红细胞凝集 致敏 抗原-抗体特异性结合 凝集 颗粒性抗原被抗体交联,形成 肉眼可见凝集 DTM@PUMCH “致敏” 抗原表位与抗体可变区可逆结合 非共价结合 静电引力 范德华引力 氢键结合力 疏水作用力 DTM@PUMCH 影响红细胞凝集的因素 DTM@PUMCH 影响红细胞凝集的因素 离心 克服红细胞间斥力,缩短细胞间距,促进凝集 形成 合适的离心力/离心时间 假阳性/假阴性 DTM@PUMCH 影响红细胞凝集的因素 抗原抗体比例 DTM@PUMCH 影响红细胞凝集的因素 pH pH 6.5~7.5 影响抗原/抗体的电荷分布 个别抗原抗体反应需要较低的pH环境 DTM@PUMCH 影响红细胞凝集的因素 温度 最佳反应温度与抗体类别有关 通常情况下 IgM 22℃ IgG 37℃ DTM@PUMCH 影响红细胞凝集的因素 抗体类别 IgM,5聚体,结合价位多,空间构象大,可在 盐水介质直接凝集红细胞 IgG,单体,结合价位少,分子小,通常需要 AHG桥接形成红细胞凝集 DTM@PUMCH 影响红细胞凝集的因素 增强介质 白蛋白 PEG 聚凝胺 酶 LISS DTM@PUMCH 抗人球蛋白试验 用于IgG抗体的检测 DAT IAT
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