N乙酰半胱氨酸对大鼠颅脑损伤后ICAM1及NFκB表达影响.docVIP

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N乙酰半胱氨酸对大鼠颅脑损伤后ICAM1及NFκB表达影响

N乙酰半胱氨酸对大鼠颅脑损伤后ICAM1及NFκB表达影响  【摘要】   目的 观察N乙酰半胱氨酸(NAC)对大鼠颅脑损伤后细胞间黏附因子1(ICAM1)和核转录因子κB(NFκB)表达的影响,探讨其脑保护机制。方法 90只Wistar大鼠随机分为假手术组(n=6)、颅脑创伤组(n=42)及颅脑创伤NAC干预组(n=42)。采用自由落体法建立大鼠颅脑创伤模型,应用免疫组织化学法检测NFκB和ICAM1表达的变化。结果 与假手术组相比,脑损伤组NFκB和ICAM1表达水平明显升高,NAC可降低NFκB和ICAM1表达,减轻炎症反应。结论 NAC可能通过抑制NFκB和ICAM1的表达,减轻炎症反应,发挥脑保护作用。 【关键词】 颅脑损伤 N 乙酰半胱氨酸 核因子 κB 细胞间黏附因子 1   Abstract: Objective To explore the effect of NAC on NFκB and ICAM1 expression after traumatic brain injury(TBI) in rats,and discuss the mechanisms of neuroprotection by NAC.Methods Ninety adult male Wistar rats were randomly divided into sham group(n=6),TBI group(n=42) and NAC group(n=42).The experimental TBI model was established by Feeney’s method.Samples were obtained after injury for inspecting the expression of ICAM1 and NFκB proteins by immunochemical method.Results Compared with the sham group, the expression levels of ICAM1 and NFκB were significantly increased after traumatic brain injury,and NAC significantly decreased the expression of ICAM1 and NFκB.Conclusion Expression of NFκB and ICAM1 decreased by NAC might be one of the mechanisms in regulating ICAM1,NFκB level and inhibiting inflammation in cortex and exerting protective function to neurons.   Key words:brain injury;Nacetylcysteine(NAC);NFκB;ICAM1   研究表明脑损伤后适量的核转录因子(NFκB)表达水平可抑制神经细胞凋亡,具有脑保护作用,但其过度激活常导致其它炎性细胞因子的过度表达,导致严重的继发性脑损害[1,2]。细胞间黏附因子1(ICAM1)可介导多种炎症细胞黏附于血管内皮细胞,是多种炎性因子发挥作用的分子基础[3],同时ICAM1的表达又受到包括NFκB在内的多种因子的调节。N乙酰半胱氨酸(NAC)是一种含有巯基的还原剂,具有稳定细胞膜、保护细胞活性和清除活性氧等作用[4],在减轻心、脑、肝等脏器的缺血再灌注损伤中的作用日益受到关注,而在创伤性颅脑伤中的作用研究较少,本试验旨在观察NAC对大鼠颅脑损伤后伤侧脑组织内NFκB和ICAM1表达的影响,探讨有关的作用机制,以期为临床治疗提供理论依据。   材料与方法   1 主要仪器、试剂和实验动物   Dympus DP70成像系统,Imageproplus 5.0(IPP5.0)数据分析系统,NAC(Sigma公司),大鼠立体定向仪(江湾Ⅱ型,上海),ICAM1多克隆抗体(兔抗)(北京博奥森生物技术有限公司);NFκB p65(F6):sc8008(鼠抗)(Santa Cruz公司),二步法免疫组化试剂盒(抗鼠和抗兔IgG PV6001/6002)、SP试剂盒和DAB试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司);3月龄健康雄性Wistar大鼠,SPF级,体重(260±20)g(甘肃省中医学院动物实验中心提供)。   2 实验动物分组及模型制备   随机分为假手术组(sham组,n=6)、颅脑创伤组(TBI组

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