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N乙酰半胱氨酸对大鼠颅脑损伤后ICAM1及NFκB表达影响
N乙酰半胱氨酸对大鼠颅脑损伤后ICAM1及NFκB表达影响
【摘要】 目的 观察N乙酰半胱氨酸(NAC)对大鼠颅脑损伤后细胞间黏附因子1(ICAM1)和核转录因子κB(NFκB)表达的影响,探讨其脑保护机制。方法 90只Wistar大鼠随机分为假手术组(n=6)、颅脑创伤组(n=42)及颅脑创伤NAC干预组(n=42)。采用自由落体法建立大鼠颅脑创伤模型,应用免疫组织化学法检测NFκB和ICAM1表达的变化。结果 与假手术组相比,脑损伤组NFκB和ICAM1表达水平明显升高,NAC可降低NFκB和ICAM1表达,减轻炎症反应。结论 NAC可能通过抑制NFκB和ICAM1的表达,减轻炎症反应,发挥脑保护作用。
【关键词】 颅脑损伤 N 乙酰半胱氨酸 核因子 κB 细胞间黏附因子 1
Abstract: Objective To explore the effect of NAC on NFκB and ICAM1 expression after traumatic brain injury(TBI) in rats,and discuss the mechanisms of neuroprotection by NAC.Methods Ninety adult male Wistar rats were randomly divided into sham group(n=6),TBI group(n=42) and NAC group(n=42).The experimental TBI model was established by Feeney’s method.Samples were obtained after injury for inspecting the expression of ICAM1 and NFκB proteins by immunochemical method.Results Compared with the sham group, the expression levels of ICAM1 and NFκB were significantly increased after traumatic brain injury,and NAC significantly decreased the expression of ICAM1 and NFκB.Conclusion Expression of NFκB and ICAM1 decreased by NAC might be one of the mechanisms in regulating ICAM1,NFκB level and inhibiting inflammation in cortex and exerting protective function to neurons.
Key words:brain injury;Nacetylcysteine(NAC);NFκB;ICAM1
研究表明脑损伤后适量的核转录因子(NFκB)表达水平可抑制神经细胞凋亡,具有脑保护作用,但其过度激活常导致其它炎性细胞因子的过度表达,导致严重的继发性脑损害[1,2]。细胞间黏附因子1(ICAM1)可介导多种炎症细胞黏附于血管内皮细胞,是多种炎性因子发挥作用的分子基础[3],同时ICAM1的表达又受到包括NFκB在内的多种因子的调节。N乙酰半胱氨酸(NAC)是一种含有巯基的还原剂,具有稳定细胞膜、保护细胞活性和清除活性氧等作用[4],在减轻心、脑、肝等脏器的缺血再灌注损伤中的作用日益受到关注,而在创伤性颅脑伤中的作用研究较少,本试验旨在观察NAC对大鼠颅脑损伤后伤侧脑组织内NFκB和ICAM1表达的影响,探讨有关的作用机制,以期为临床治疗提供理论依据。
材料与方法
1 主要仪器、试剂和实验动物
Dympus DP70成像系统,Imageproplus 5.0(IPP5.0)数据分析系统,NAC(Sigma公司),大鼠立体定向仪(江湾Ⅱ型,上海),ICAM1多克隆抗体(兔抗)(北京博奥森生物技术有限公司);NFκB p65(F6):sc8008(鼠抗)(Santa Cruz公司),二步法免疫组化试剂盒(抗鼠和抗兔IgG PV6001/6002)、SP试剂盒和DAB试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司);3月龄健康雄性Wistar大鼠,SPF级,体重(260±20)g(甘肃省中医学院动物实验中心提供)。
2 实验动物分组及模型制备
随机分为假手术组(sham组,n=6)、颅脑创伤组(TBI组
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