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DNA修复酶在胃癌组织中表达变化及临床意义 　 作者：吴迎爽 周宁 程毅 魏贵亮 谢震 祁贺 薄爱华 张晓丽 邢立强 【摘要】 目的：检测胃癌组织中DNA损伤修复酶(O6—甲基鸟嘌呤—DNA甲基转移酶O6—methylguanine DNA methyltransferase, MGMT)的表达变化，探讨其表达和胃癌临床病理特征之间的关系,进一步用于指导临床化疗方案的制定。方法：采用免疫组化方法（SABC法）检测55例胃癌标本中MGMT的表达情况。结果：MGMT在胃癌组织中的阳性表达率为43.64%（24/55），其阳性表达与年龄、病理类型有关，而与性别`、分化程度、侵犯深度、淋巴结转移的相关性不明显。结论：MGMT对胃癌化学治疗方案的制定有指导作用。 【关键词】 胃癌；DNA损伤修复酶；免疫组化 【ABSTRACT】 Objective: To investigate the expression change of DNA repairing enzyme MGMT in gastric carcinoma,and the relationship between the expression and pathologic charateristic,so as to guide makingup of treating plan. Methods: Detect the expression of 55 cases with gastric carcinoma by SABC immunohistochemistry. Results:The positive expression rate of MGMT in the gastric carcinoma was 43.64%(24/55).There was a signficant statistic difference between age and pathologic type in the expression of MGMT, but no obvious correlation among sex, defferentiation degree,invasion depth and lymphnode metastasis.Conclusion:The expression of MGMT can guide to make up a plan for treating gastric carcinoma. 【KEY WORD】 Gastri carcinoma; DNA repairing enzyme(MGMT); Immunohistochemistry 烷化剂与DNA相互作用可以在DNA分子中形成各种烷化碱基，其中O6—甲基鸟嘌呤与基因突变和癌症发生关系最为密切。生物体内含有一种高度专一性DNA修复酶即O6—甲基鸟嘌呤—DNA甲基转移酶（O6—methylguanineDNA methyltransferase MGMT），该酶能够有效地修复DNA分子中O6位鸟嘌呤的烷化碱基,在防止烷化剂诱导的致癌、致突变和抗癌化疗过程中均起重要作用[1]，从而有效维持着基因组的稳定。本文主要讨论DNA损伤修复酶MGMT在胃癌中的表达变化及其与胃癌临床病理特征之间的关系,进一步用于指导胃癌化学治疗方案的制定。 1 资料和方法 1.1 标本来源 收集河北北方学院附属第一医院肿瘤外科2002.3～2005.4月间胃癌根治术切除的55例标本。其中女性患者17例,男性患者38例;年龄在29～79岁之间,平均年龄为53.87岁;高分化腺癌28例,中分化腺癌6例,低分化腺癌12例；粘液腺癌9例。所有患者术前均未经化疗和放疗。 1.2 试剂 兔抗人MGMT多克隆抗体购自武汉博士德生物有限公司,SABC免疫组化试剂盒及DAB显色试剂盒均购自北京中杉金桥生物技有限公司。 1.3 方法 （1）术后立即取材,以4%多聚甲醛0.1MPSB(pH=7.2内含0.1THORN;PS)固定约3h,常规脱水，浸蜡，包埋,连续切片,厚度约5μm；（2）将切片贴于涂有多聚赖氨酸的载玻片上,常规脱蜡至水；（3）抗原热修复：将切片浸入0.01M枸橼酸盐缓冲液，微波炉加热至沸腾，间隔5～10min,反复1～2次；（4）滴加5%BSA封闭液,室温20min;(5)滴加一抗(兔抗人IgG),4℃过夜;(6)0.01mol/L PBS冲洗2min×3次;(7)滴加生物素化山羊抗小鼠IgG,20℃～37℃,20min;(8)0.01mol/L PBS冲洗2min×3次;(9)滴加试剂SABC,20℃～37℃,20min;(10)0.01mol/L PBS冲洗5min×4次;(11)DA