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广西桂郁金对小鼠免疫性肝损伤保护作用 　 作者：秦华珍，李彬，时博，李世阳，郑作文，邓家刚 【摘要】 目的观察广西桂郁金（GGYJ）对卡介苗(BCG)+脂多糖(LPS)所致小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法采用BCG+LPS尾静脉注射造成免疫性肝损伤动物模型，观察GGYJ对各组小鼠血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLO）的含量及肝组织匀浆超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平的影响。结果GGYJ可明显降低免疫性肝损伤小鼠血清中ALT、AST、GLO水平，升高血清ALB水平，提高A/G的比值；减少肝组织匀浆的MDA含量，升高肝匀浆SOD、GSH-Px含量。结论GGYJ对BCG+ LPS尾静脉注射造成的小鼠免疫性肝损伤有明显的保护作用，其作用与抗脂质过氧化有关。 【关键词】 GGYJ； 免疫性肝损伤； 保护作用 广西桂郁金（GGYJ）是商品郁金的品种之一，为姜科植物广西莪术Curcuma kwangsiensis S. G. Lee et C.F. Liang的块根。主产于广西，近几年产量约占全国郁金总产量的60%以上［1］，对我国市场有较大的影响力。郁金具有活血化瘀、行气解郁、清心开窍、利胆退黄的功效，临床常用于各种肝胆疾病［2～4］。据统计，目前我国大约有1.2亿乙型肝炎病毒（HBV）感染者，慢性乙肝病人超过3000万，国内乙型肝炎病毒感染的人数远远高于其他肝炎病毒感染人数。在我国法定报告传染病中，乙肝发病数和发病率一直高居前列［5］。广西是乙肝的高发区，1996～2005年乙肝报告发病率始终处于全区各类传染病报告发病的前3位［6］。为了筛选治疗肝炎的药物，本实验对GGYJ抗免疫性肝损伤的作用进行了观察，现报告如下。 　　1 材料与仪器 　　1.1 动物清洁级昆明种小鼠72只, 体质量(20±2)ｇ，雌雄各半，由广西医科大学实验动物中心提供，动物许可证号：SCXK 桂 2003-0003。 　　1.2 药材GGYJ：采集于广西玉林，经广西中医学院中药鉴定学教研室蔡毅教授鉴定为姜科植物广西莪术Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C. F. Liang的块根。取GGYJ药材分别加12倍、10倍量水提取2次，第1次2h,第2次1.5h，提取液经过滤、合并、浓缩成可供小鼠灌胃的最大浓度的稠膏，相当于3.4g生药/ml。 　　1.3 试剂BCG：中国生物技术集团公司上海生物制品研究所生产，批号：2004060501；大肠杆菌LPS：Sigma公司产品，进口分装；联苯双酯(BPD)：广州市星群药业有限公司，批号：ALT、AST测定试剂盒，南京建成生物工程研究所，批号：050423；SOD、MDA、GSH-Px：南京建成生物工程研究所，批号：050606。 　　1.4 仪器半自动生化分析仪（德国），型号Chem300；高速低温离心机（德国），Biofuge stratos；超声波细胞粉碎机，宁波新芝科器研究院，型号JY92-2D；Agilent8453紫外可见分光光度计；722-紫外光栅分光光度计，上海第三分析仪器厂。 　　2 方法 　　2.1 分组动物随机分为6组，即空白对照组，模型对照组，BPD对照组（研末，以蒸馏水配成一定浓度的混悬液，剂量为600 mg/kg），GGYJ高、中、低剂量组（28，14，7g/kg），每组12只。各组按体重分别以0.2 ml/10g剂量给药，1次/d，连续给药12 d。 　　2.2 造模给药第1天造模，除空白对照组外，其余5组小鼠均尾静脉注射BCG溶液（用生理盐水配置BCG溶液，使每ml约含108个活菌）0.2ml/只。12 d后经尾静脉注射7.5μg LPS生理盐水溶液，空白对照组同法给予等量的生理盐水，禁食（自由饮水）10 h后各组经眼球后静脉丛取血，常规分离血清。然后处死小鼠，取肝脏，用生理盐水配10%肝组织，用超声波细胞粉碎机匀浆，低温离心，按试剂盒说明书所述方法检测血清ALT、AST的含量（赖氏法），按试剂盒说明书所述方法用Agilent8453紫外可见分光光度计测定肝匀浆中SOD，MDA，GSH-Px的含量。 　　2.3 统计学处理各项数据均以±s表示，统计分析采用SPSS13.0软件进行。 　　3 实验结果 　　3.1 对血清ALT、AST含量的影响实验结果见表1。表1 GGYJ对免疫性肝损伤小鼠血清ALT、AST的影响（略） 　　表1显示，与空白组相比较,模型组血清ALT、AST水平升高, Plt;0.01，说明模型建立成功。与模型组比较，BPD组及GGYJ高、中剂量组均能非常显著地降低小鼠血清中升高的ALT水平（ Plt;0.01）；GGYJ低剂量组则