细胞生长因子对正常氧和低氧条件下犬骨髓间充质-中国医药生物技术.pdf

336 中国医药生物技术 2013 年 10 月第 8 卷第 5 期 Chin Med Biotechnol, October 2013, Vol. 8, No. 5 DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2013.05.003 ·论著· 细胞生长因子对正常氧和低氧条件下 犬骨髓间充质干细胞迁移的影响 缪黄泰，吴星欣，辛毅，王晓，甄雷，聂绍平 【摘要】 环境下对 MSCs 的趋化作用研究较少。本研究进 目的 观察比较正常氧和低氧环境下，不同细胞生长因子对 一步阐明不同细胞生长因子在正常氧和低氧环境 犬骨髓间充质干细胞迁移的影响。 下对 MSCs 趋化迁移的影响，为深入研究其介导 方法 抽取犬骨髓，采用密度梯度离心法分离骨髓间充质干 的组织修复和细胞再生治疗奠定细胞学基础，为再 细胞并进行培养。在倒置显微镜下观察细胞的形态变化；取 生医学微环境条件研究提供参考。 第 3 代细胞利用流式细胞术检测其表型特征；加入碱性成 纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子和胰岛素样生长因 1 材料与方法 子-1，在正常氧和低氧条件下行迁移和划痕实验来观察细胞 1.1 材料 趋化能力。 1.1.1 实验动物 雄性比格犬 3 条，体重 （20.0 ± 结果 细胞迁移情况与氧环境及细胞生长因子的存在和种 2.8 ）kg ，12 ~ 18 月龄，由北京来福实验动物养殖 类均有关联。碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子 场提供，实验动物许可证号：SYXK （京）2010-0016 ， 和胰岛素样生长因子-1 均能促进骨髓间充质干细胞的迁 实验过程中对动物的处置遵循 2006 年科学技术 移，碱性成纤维细胞生长因子较其他细胞生长因子显示出更 部《关于善待实验动物的指导性意见》。 强的促进迁移作用，这种作用在低氧环境下更为明显。 1.1.2 主要试剂及仪器 胎牛血清（FBS ）、低糖 DMEM 培养基（LG/DMEM ）为美国 Gibco 公司 结论 低氧环境下骨髓间充质干细胞的迁移能力较正常氧 产品；流式抗犬抗体 CD105 、CD73、CD14、CD31 环境下更强，碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子 为英国 AbD Serotec 公司产品；碱性成纤维细胞生 和胰岛素样生长因子-1 的存在均有利于骨髓间充质干细胞 长因子（bFGF ）、血管内皮生长因子（VEGF ）、胰 的迁移。 岛素样生长因子-1 （IGF-1 ）为美国 Peprotech 公司 【关键词】干细胞因子； 间质干细胞； 细胞运动； 氧 产品；4000B 型荧光倒置显微镜为德国 Leica 公司 浓度 产品；BX-51 型荧光正置显微镜为日本 Olympus 中国医药生物技术, 2013, 8(5):336-343 公司产品；三气培养箱和 CO2 细胞培养箱为美国 Thermo 公司产品；超净工作台为北京昌平长城净 间充质干细胞（mesenchymal stem cells ，MSCs ）