O型口蹄疫病毒VP0和VP1蛋白的可溶性表达与反应原性分析.pdfVIP

河南农业科学 2，〇n 4，6 ( 2 ) : 105-110 Journal of Henan Agricultural Sciences d 〇i ：10. 15933/j . cnki . 1004-3268.2017.02.022 〇型口蹄疫病毒V P O 和 V P 1 蛋白的 可溶性表达与反应原性分析 赵宝磊1 ，刘运超2 ，陈玉梅2 ，姬鹏超2 ，王聚财1 ，刘 畅2 ，杨素珍2，张改平 (1.河南农业大学牧医工程学院，河 南 郑 州 450002; 2. 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室 / 农业部动物免疫学重点实验室，河 南 郑 州 450002) 摘要：为 了 高 效 可 溶 性 表 达 〇型口蹄 疫 病 毒 （F M D V ) V P 0 、V P 1 结 构 蛋 白 ，根据大肠杆菌密码子的 偏 爱 性 优 化 合 成 F P 0 和 V P 7 基 因 片 段 ，并 将 其 克 隆 到 pE - S U M O 载 体 中 ，构 建 重 组 质 粒 S U M O - V P 0 和 S U M O - V P 1 将，重 组 质 粒 转 化 到 大 肠 杆 菌 BL21(DE3) 感 受 态 细 胞 中 进 行 诱 导 表 达 ，并优化 诱 导温度、时 间 和 IPTG浓度等表达条件。结 果 显 示 ，S U M O - V P 0 可溶性蛋白表达的最佳条件为： 20 °C 条 件 下 ，0. 1 mmol/L IPTG诱 导 表 达 8 h;SUM0 - V P 1 可溶性蛋白表达的最佳条件为 ：37 °C 条 件 下 ，0. 1 mmol/L IPTG诱 导 表 达 12 h 。SDS - P A G E 电 泳 和Western blot结 果 表 明 ，表达的511]\/[〇- VP0、S U M O - V P 1 可 溶 性 蛋 白 能 够 被 抗 F M D V 的阳性血清识别，具有很好的反应原性。 关键词：口蹄疫病毒；VP 〇、V P l结 构 蛋 白 ；可 溶性表达；S U M O 标签 中图分类号：S855.3 文献标志码 ：A 文章编号 ：1004 -3268(2017)02 -0105 -06 Soluble Expression and Immuneoreactivity Analysis of FMDV VPO and VP1 Protein Z H A O Baolei1 , LIU Yunchao2, C H E N Yumei2,JI Pengchao2, W A N G Jucai1 , LIU Chang2, Y A N G Suzhen2 , Z H A N G Gaiping1,2* * (1. College of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Henan Agricultural Universitey, Zhengzhou 450002 , China ； 2. Key Laboratory of Animal Immunology of Ministry of Agriculture/Key Laboratory of Animal Immunology, Henan Academy of Agricultural Sciences, Zhengzhou 450002 ,