基于微孔过滤板的蛋白吸附高通量筛选方法-化工学报.PDFVIP

第68 卷 第6 期 化 工 学 报 Vol.68 No.6 June 2017 2017 年6 月 CIESC Journal ·2399 · DOI ：10.11949/j.issn.0438-1157 基于微孔过滤板的蛋白吸附高通量筛选方法 褚文宁，林东强，姚善泾 （浙江大学化学工程与生物工程学院，生物质化工教育部重点实验室，浙江杭州 310027 ） 摘要：针对色谱分离过程优化，建立了基于微孔过滤板的蛋白吸附高通量筛选方法，用于介质初筛、吸附性能考 察、吸附等温线和吸附动力学测定、吸附和洗脱条件优化等。首先优化了96 孔过滤板的操作参数，以2 种离子交 换介质和2 种混合模式介质为典型代表，采用微孔过滤板方法考察了不同介质和液相条件下牛血清白蛋白的吸附， 得到结合载量分布图，确定了合适的蛋白吸附和解吸条件。进一步测定了4 种介质在特定吸附条件下的吸附等温 线和吸附动力学曲线，获得吸附相关参数。最后，采用微孔过滤板进行了洗脱条件优化，并与填充柱色谱分离进 行比较，验证了方法的可靠性。结果表明，基于微孔过滤板的蛋白吸附高通量筛选是切实可行的，可以快速筛选 色谱介质和液相，优化蛋白分离条件，具有资源消耗小、实验通量大、研发周期短、适用性广、稳定性高的特点， 是蛋白色谱分离过程优化的一种新方法。 关键词：高通量筛选；微孔过滤板；色谱分离；吸附；蛋白分离 中图分类号：TQ 028.8 文献标志码：A 文章编号：0438—1157 （2017 ）06—2399—08 High-throughput screening methods for protein adsorption evaluation with microtiter filter plate CHU Wenning, LIN Dongqiang, YAO Shanjing (Key Laboratory of Biomass Chemical Engineering of Ministry of Education, College of Chemical and Biological Engineering, Zhejiang University, Hangzhou 310027, Zhejiang, China) Abstract: Aiming at the process optimization of chromatographic separation, the high-throughput screening methods of protein adsorption with microtiter filter plate were established for initial resin screening, adsorption properties evaluation, adsorption isotherms and adsorption kinetics measurement, and adsorption and elution cond