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不同光质和氮浓度对铁皮石斛组培苗的影响
项目可行性报告Dendroium candidium Wall ex Lindl.)又名黑节草,属兰科石斛属植物多年附生草本植物,生境较为独特,主要生长于适宜温度、高湿的阴坡、半阴坡微酸性岩层峭壁及丛林树上或林下岩石上[1],常群居分布,有林木遮阴。
铁皮石斛是我国传统名贵中药[2]。它的药用价值早在《本草纲目》中就又记载,其主要有效成分是石斛碱、多糖等成分。石斛多糖的药理作用主要表现在免疫,强壮,抗衰老等方面;生物碱的药理作用主要表现在抗肿瘤,对心血管,胃肠道抑制作用及止痛退热等作用。《中华人民共和国药典》(化学工业出版社,2000)对药用石斛功能与主治的描述为:益胃生津,滋阴清热,用于阴伤津亏,口干烦渴,食少干呕,病后虚弱,目暗不明。现代药效研究证明,铁皮石斛具有增强人体免疫力、防止衰老、消除肿瘤、抑制癌症、恢复嗓音、抗声带疲劳等作用。国内有关铁皮石斛组织培养、化学成分、药理作用、菌根真菌等在生物体中常见的而具有碱性的含氮有机化合物nitrate reductase, NR)的刺激作用很可能是直接的,因为NR的辅基有黄素(FAD)和喋呤[22],而现在认为蓝光受体的生色团就含有黄素和喋呤[23]。因此,蓝光对NR的激活作用可能会比其他光质强[24]。植物生长发育所需要的氮素主要来自硝酸盐(N03-)同化。NR是N03-还原过程第一步反应的催化酶,也是关键的限速酶,光和无机氮盐对其活性具有重要的调节作用[25],硝酸亚硝酸盐的还原是由亚硝酸还原酶(nitrite reductase,NiR)催化。并且植物氮素营养状况的好坏,直接影响光合速率和生长发育,并最终影响植物的产量和光能利用率。在一定范围内,光合速率与叶片含氮量成直线相关[26]。因此,不同光质处理结合氮素营养分析药用植物的生长和药用成分的积累,能够较好地指导生产,并在理论上有所创新和发展。
本研究主要针对铁皮石斛野外产量不高,药用成分不稳定等缺陷,采用组织培养方式进行繁殖,并借鉴利用不同光质和氮浓度能提高农作物含氮物质和碳水化合物含量技术,对铁皮石斛进行光质和氮浓度的处理。通过测定其中硝酸还原酶和亚硝酸还原酶的活性变化,了解铁皮石斛对氮的吸收和利用情况,探索铁皮石斛对氮的吸收机理,从而提高铁皮石斛的生长速率。同时,通过比较其药用成份与对照组的差异,来确定生物碱和多糖含量最高的培养条件。浙江是目前国内铁皮石斛产业化程度最高的地方,也是生产企业最集中的省份,铁皮石斛的人工栽培,一直被誉为药学上的歌德巴赫猜想省有关部门从源头上规范铁皮石斛产业国内外研究现状和发展趋势56-60.
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