依赖dna的rna聚合酶.ppt

tRNA前体分子的加工 a、切除tRNA前体两端多余的序列： 5’—端切除几到10个核苷酸。 b、末端添加：3’-端添加CCA序列。 c、修饰：形成稀有碱基如DH2 。 RNAase P RNAase F RNAase P RNAase F RNAase D RNAase D ACC ? ? ? 表示核酸内切酶的作用 表示核苷酸转移酶的作用 表示核酸外切酶的作用 表示异构化酶的作用 RNase P：是由蛋白和RNA组成的复合体。分子量为130kDa RNA长375nt 内切酶的活性 识别二级结构 ◆ exon (外显子) 在真核生物结构基因中，编码区叫外显子 ◆ intron (内含子) ： 非编码区叫内含子 ◆断裂基因 (split gene ) 编码一个蛋白质分子的核苷酸序列被多个插入片断所隔开 二. 真核生物RNA的转录后加工 三种不同的内含子 ◆内含子的剪接需形成剪接体的形式，除各种蛋 白因子外还需各种snRNP的参与。如真核的核 mRNA。 ◆内含子的剪接需要蛋白酶的参与，如tRNA。 ◆内含子可自我剪接,不需任何蛋白质参与 I ：真核的细胞器基因，低等真核的RNA基因 II：真菌的线粒体和植物叶绿体基因 hnRNA (heterogeneous nuclear RNA)：核内不均一RNA，指核内含有内含子的未拼接的mRNA前体。 由转变成的加工过程包括： ① 加帽 ② 加尾 ③链内部核苷酸甲基化 ④通过拼接去除由内含子转录来的序列 snRNA (small nuclear RNA)： 核内小型RNA，可与蛋白质结合形成拼接体， 参与 hnRNA的拼接； types：U1，U2，U3，U4，U5，U6, etc 1. mRNA的加工 hnRNA的末端修饰 G 5’端加帽 3‘端加poly(A)尾巴 帽0 帽1 帽2 m7GpppGpN m7GpppGmpN m7GpppGmpNm 5’端加帽 鸟苷酸转移酶 5’端帽子的功能： ◆ 稳定成熟mRNA的结构 ◆ 促进mRNA与核糖体的结合 hnRNA + nATP poly A polymerase Mg2+ mRNA-(A)n +nPPi 3’端加poly(A)尾巴 3’poly(A)尾巴的作用： ◆稳定mRNA ◆ mRNA转移到细胞质 ◆翻译调控 Mature mRNA hnRNA Insulin (胰岛素) gene E1 E2 E3 5’— —3′ S Pre B C C A 5’— —3′ S Pre B C C A Preproinsulin 前胰岛素原 mRNA前体（hnRNA）的拼接 ◆识别过程 全酶与DNA分子随机结合，形成松弛复合物 σ因子在DNA双链寻找启动子 σ因子识别转录起始点（-35区），促使形成 封闭复合物，并滑动到-10区 2 起始 ◆ RNA聚合酶全酶促使局部双链解开 ◆ “关闭”复合体转变为“开放”复合体 ◆并催化ATP或GTP与另外一个三磷酸核苷聚合，形 成第一个3,5-磷酸二酯键。 GpN Also called transcription complex (转录复合物), including core enzyme, template, and transcripts. Transcription bubble（转录空泡） 3 延长 σ因子从全酶上脱离. DNA的解链和重复螺旋化 余下的核心酶继续沿DNA链移动，连续聚合RNA. The ? cycle 5’ RNA DNA 4 终止 ◆终止子：DNA转录的终止信号(terminator) ◆不依赖ρ因子的终止子:内在终止子（intrinsic terminator ） DNA顺序有双重对称(dyad),富含GC,可形成茎环结构DNA 模板链中有一串约6个A，转录为RNA3端的U 5’ 3’ 自动终止 大肠杆菌两类终止子的回文结构 不依赖于Rho（?）的终止子 依赖于Rho（?）的终止子 系列U ◆依赖ρ因子的终止子（ρ-dependent terminator） 有发夹结构，但GC含量少 无U串 依赖ρ因子的终止 ρfactor ◆ Binding the C-rich region of transcripts ◆ ATPase ◆ helicase functions AUCGCUACCUCAUAUCCGCACCUCCCUCAAACGCUACC