朱海强－conversionofmaturebcellsintotcellsby.pptVIP

Conversion of mature B cells into T cells by dedifferentiation to uncommitted progenitors 成熟B细胞通过去分化成一种未定型祖细胞而转化为T细胞 朱海强Abstract Lineage commitment and differentiation to a mature cell type are considered to be unidirectional and irreversible processes under physiological conditions. 造血祖细胞可以在Pax5基因的一定作用下定向分化为B细胞系，并且在危急时，在Pax5基因所编码的转录因子的作用下可以转变为成熟B淋巴细胞 外周淋巴组织的成熟B细胞 去除Pax5 dedifferentiate 未定型祖细胞 In vivo T lymphopoiesis In thymus T lymphopoiesis In thymus 1、携带有免疫球蛋白的重、轻链 2、具有T细胞进行免疫反应的各种功能 成熟B细胞缺失Pax5基因的鼠 长出侵入性淋巴瘤块 1、完全缺失Pax5的晚期B细胞可以初始淋巴瘤的产生 2、尽管外周B细胞为成熟的分化细胞，却仍然具有不稳定性（可塑性） 将仅在外周淋巴组织里的B cell的 B-cell-specific Cd19-cre gene有效的去除了被标记(简写为fl)的Pax5等位基因。这些去除Pax5等位基因的细胞用来分析Cd19-cre Pax5fl/- mice中的成熟的B cell的Pax5基因的功能。 Cd19-cre Pax5fl/+ Eμ-bc12 Cd19-cre Pax5fl/- Cd19-cre Pax5fl/- 脾脏肿大和大块的淋巴结 死 活 说明了Pax5基因在祖细胞分化为B cell方面有重要影响作用。单等位基因的细胞能产生淋巴瘤。 用特异性缺陷确定细胞是我们需要的细胞 lung liver kidney thymus 脾脏肿大和大块的淋巴结 - + + - Lymphocyte progenitor 是被Pax5抑制的基因 B cell特异的 右图：Summary of the V(D)J recombination analysis. The PCR fragments corresponding to the rearrangements of the tumours shown in left photo were cloned and sequenced to determine the reading frame of the individual rearranged Ig alleles. n.d., not detected; oc, oligoclonal. 为了检测 1、所有的tumours中都发现有片段重组和存在Ig h的表达，说明是这些tumours源自于之前移植的细胞.很多的tumours里面发现有片段重组的Ig k和Ig l的存在。 这不同于被删除Pax5的pro-B cell，pro-B cell是不能产生VHJ558-DJH 和VК-JК重组体的。 2、这些late pre-B cell则产生了最初开始阶段就有的功能免疫球蛋白的重、轻链重组体。这个说明了在Cd19-cre Pax5fl/- mice身上的祖细胞淋巴瘤肯定是源自late pre-B 细胞，最大可能是来自于未成熟或者成熟的B cell 。确定了研究的目标细胞是未成熟的或者成熟的B cell，而不是B cell祖细胞。 pro-B cell是指B cell的祖细胞， late pre-B cell是指由pro-B cell分化的 B细胞，分为未成熟的和成熟的B cell 。 证明细胞存在的不稳定性，即在祖细胞、B细胞和T细胞之间变化的关系 Pax5 deletion In vivo with Cd19-cre In vitro with the CreED-30 transgene encoding a hormone-inducible Creoestrogen receptor fusion (Cre-ER) protein Anti-IL7Rα antibody (阻止B cell的生长) 限制了外周淋巴组织中的祖细胞和未成熟B cell生长分化成成熟B cell ，留下的就是成熟的B cell。（在注射入小鼠体内前经过40h的4 羟基三苯氧胺的浸泡，以去除呗标记有Pax5的等位基因的一些细胞） Lin-