同型半胱氨酸对内皮细胞Bcl鄄2基因甲基化水平-中国动脉硬化杂志.PDF

CN43鄄1262/ R摇 中国动脉硬化杂志2013年第21卷第12期 1075 [文章编号]摇 1007鄄3949(2013)21鄄12鄄1075鄄04 ·实验研究 · 同型半胱氨酸对内皮细胞 Bcl鄄2基因甲基化水平的影响 1 2 1 李 录 ,贾绍斌 ,孙 娜 (1.宁夏医科大学,2.宁夏医科大学附属总院心脏中心,宁夏银川市750004) [关键词]摇 动脉粥样硬化;摇 同型半胱氨酸;摇 人脐静脉内皮细胞;摇 Bcl鄄2;摇 甲基化 [摘摇 要]摇 目的摇 研究同型半胱氨酸对人脐静脉内皮细胞Bcl鄄2基因启动子区甲基化水平及其表达的影响。 方法 以人脐静脉内皮细胞为实验对象,用含有不同浓度同型半胱氨酸的RPMI1640培养液对其作用48 h,MTT 法测定细胞 增殖生长能力并确定实验药物浓度;流式细胞术测定细胞凋亡水平;荧光定量PCR测定Bcl鄄2 mRNA表达;甲基化特 异性PCR联合巢式降落式PCR测定Bcl鄄2启动子区甲基化水平。 结果摇 同型半胱氨酸对人脐静脉内皮细胞的增殖 能力有明显的抑制作用,OD值从0郾99依0郾05逐渐下降至0郾28依0郾03(P 0郾01),呈明显的剂量效应关系;与对照组 相比,实验组细胞凋亡率由2郾30% 依0郾60%上升至16郾40% 依0郾73%(P 0郾01),Bcl鄄2 mRNA表达明显下降(P 0郾01),Bcl鄄2基因启动子区甲基化水平降低(P0郾05)。 结论摇 同型半胱氨酸通过下调Bcl鄄2启动子区的甲基化水平 导致其mRNA表达水平减少,继而诱发内皮细胞凋亡,这可能在同型半胱氨酸促动脉粥样硬化过程中起到重要作用。 [中图分类号]摇 R543 [文献标识码]摇 A Effects of Homocysteine on Bcl鄄2 Gene Methylation of Endothelial Cell 1 2 1 LI Lu ,JIA Shao鄄Bin ,and SUN Na (1.Ningxia Medical University,2. Heart Center,Affiliated General Hospital of Ningxia Medical University, Yingchuan, Ningxia750004,China) [KEY WORDS]摇 Atherosclerosis;摇 Homocysteine;摇 Human Umbilical Endothelial Cell;摇 Bcl鄄2;摇 Methylation [ABSTRACT]摇 摇 Aim摇 To study the effects of homocysteine (Hcy) on methylation of Bcl鄄2 in human umbilical endo鄄 thelial cells (HUVEC). 摇 摇 Methods摇 After human umbilical endothelial cellsweretreatedwith different concentrations of Hcy for48 h,MTTwasusedtomeasurethereproductionof humanumbilical endothelial cellsandIC50 concentrationof Hcy,theflow cytometry assaywasusedtodetecttherateof cell apoptosis,theexpressionsof Bcl鄄2 mRNAlevelwereana鄄 lyzed by fluorescence quantitative PC