丙泊酚对鼠脑细胞ATR和PPAR-γ表达的影响.pdfVIP

丙泊酚对鼠脑细胞 ATR 及 PPAR- γ表达的影响 研究生：胡燕梅 导师：曾庆繁 专业：麻醉 摘 要：目的 观察丙泊酚对鼠脑细胞中血管紧张素受体（ATR）及过氧化物酶体增殖物激活受 体- γ （PPAR- γ）表达的影响，探究丙泊酚对脑保护作用的可能机制。方法 将 16 只成年雄性 Wistar-Kyoto(WKY)大鼠随机分为 2 组，丙泊酚组（WP,n=8）连续三天腹腔首次注射丙泊酚 100mg/kg，后每隔一小时注射 50mg/kg，连续 2 小时(共注射 3 次)；对照组（W,n=8）同期注射 等容量的生理盐水，第 3 日注射第3 次后 3 小时断头处死取脑组织，-80℃冰箱保存待检。Elisa 法检测半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3），血管紧张素Ⅱ1 受体（AT1R）、血管紧张素Ⅱ2受体（AT2R） 及过氧化物酶体增殖物激活受体 (PPAR- γ)的含量；流式细胞术 ( flow cytometry assay,FCA) 检测脑细胞凋亡率。结果 WP 组 AT1R （205.38±2.48）与W 组（211.50±10.62）比较表达显 著下降，差异有统计学意义（P＜0.05）；WP 组 AT2R （154.90±4.74）与W 组（145.71±4.74） 比较表达显著升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；WP 组 PPAR- γ （268.76±8.61）与W 组 （243.39±9.41）比较表达显著升高，差异有统计学意义（P＜0.05）;WP组 Caspase-3 （44.75±2.41）与W 组（39.44±1.02）比较表达显著升高，差异有统计学意义（P＜0.05）； WP 组细胞凋亡率（3.26±2.51）与W 组（16.16±4.06）比较显著下降，差异有统计学意义（P ＜0.05）；结论 丙泊酚降低 AT1R 表达，促进 AT2R 及 PPAR- γ表达，可激活神经细胞内源性保 护机制。 关键词 丙泊酚；脑细胞；血管紧张素Ⅱ受体；过氧化物酶体增殖物激活受体 前言 麻醉药对脑细胞的保护或损害作用及其细胞、分子机制是麻醉领域研究的热点。丙泊酚是临床 上常用的全身麻醉药物，对生理及病理状态下的脑神经细胞功能产生不同的影响[1]。对如脑缺 血再灌注、脑损伤的神经细胞会产生保护作用[1],可能的机制有：使脑细胞代谢率下降、抑制 线粒体通透性转换孔（mPTP, mitoch-ondrial permeability transition pore）[2]、可降低 一氧化氮合酶（NOS)活性、抑制一氧化氮（NO）的合成[3]、激活磷脂酰肌醇-3 激酶 /Akt(Phosphatidyl inositol-3-kinase/Akt，PI-3K/Akt)信号转导通路[4]、影响细胞外信号 调节激酶（extracellularsignal-regulated kinase，ERK）信号转导通路活性[5]、抑制细胞 凋亡等[6]。对生长发育期（新生鼠、小儿）或退行性变（老年病人）患者有损害作用，促进神 经细胞的凋亡[7]，可使患者的学习和记忆能力在一定时期内产生不同程度障碍[8,9]。 研究表明：脑内有独立存在的肾素-血管紧张素系统（RAS)[10]，并且和局部 RAS 一起参与脑 结构和功能的调节，RAS 中主要成分是血管紧张素Ⅱ （AngⅡ)，AngⅡ可引起新生鼠神经细胞凋 亡、老年痴呆、帕金森氏病[11,12]等。AngⅡ通过与受体结合，经由促分裂原活化蛋白激酶（MAPK） 信号传导体系对细胞内各种生物学效应进行适当的调节。ERK 是将信号从细胞表面受体传导至细 胞核的重要环节，它是 MAPK 家族里重要的成员，通过本身丝/苏氨酸磷酸化，发挥信号传递的 功能[13]。在激活 ERK 底物蛋白主要分布在细胞质或细胞核中的特异性发挥生理作用，导致蛋 白的表达或激活特定的蛋白质在细胞中的现象，对细胞的增殖、分化和凋亡等进行调控 [14]。 目前研究证实，AngⅡ导致的作用主要是通过 AT1R 介导，而 AT2R 激活有可能起到对抗 AT1R 的 作用。近年来的研究提示，AngⅡ的脑保护作用可能是通过AT2R 实现的。在 Fournier [ 15 ] 的研究表明，在动物模型后预后脑室注射氯沙坦能显著提高动物，但当AT2 受体阻滞剂 （PD123177）阻断后，氯沙坦的脑保护作用即消失。 AT2R 基因敲除小鼠，经实验证实，与野生 型相比 AT2R 基因敲除小鼠大脑中动脉闭塞的缺血性脑损伤引起的更严重，更严重的脑血流量减 少，过氧化物的产生明显增加[16]。这些提示了 AT2R