真菌检查--幻灯片.pptVIP

第四节 真菌感染检查 检验特点 形态学检查为检测真菌的重要手段 抗原检测适合血清和脑脊液中隐球菌、念珠菌、荚膜组织胞浆菌。 血清学诊断适用于深部真菌感染。 检测程序 显微镜检查-湿片法或直接涂片高倍视野镜检，见有菌丝孢子或单细胞真菌（有诊断价值，但不能确定真菌种类） 真菌的菌落-真菌分类重要的依据 真菌的菌落一般是指在一定基质上，接种某种真菌的一个孢子或一段菌丝，经过培养，向四周蔓延生长出丝状的群体称为真菌菌落。菌落呈放射状生长，因而菌落外周的生命力最旺盛。在不同成分的培养基上和不同条件下培养，同一种真菌，形成的菌落也有差别。因此，菌落的形态观察是指在固定的条件下，菌落所表现的形状、大小、色泽和结构等。不同的真菌菌落所表现特征差别显著，它为真菌分类工作提供了重要的依据。 菌落颜色 除酵母菌的菌落比较简单，丝状真菌的菌落形态各种各样。常以下述特征加以描述。 其颜色的多样很难用色泽描述，常借助于色谱加以鉴别。很多真菌产生多种颜色的色素，使菌落的背面染有颜色，有的甚至分泌可溶性色素，扩散到全部基质中去。 菌落质地 气生菌丝构成表面菌丝体质地。底部菌丝体埋伏于培养基中或紧贴培养基表面向四周蔓延， 由底部体直接生出分生孢子梗，菌落外观呈短茸毛状， 由底部菌丝体生出气生菌丝，再由它生出分生孢子梗，因而往往有缠绕的气生菌丝团，一般菌落较厚，呈絮状。 也有部分气生菌丝扭结成绳索、还有分生孢子梗自底部菌丝成束地生长，在菌落的外观上成粒状或粉状。 有些真菌产生子实体或菌核，则菌落表面呈颗粒结构。 有的菌落出现同心环或辐射状沟纹。 有的真菌只在菌落中间区域生出分生孢子头，边缘菌丝则不生育。 菌落的大小也大有不同，有些种的菌落可蔓延扩展到整个培养基，而另一些种的菌落则局限生长。 真菌菌落外观结构描述 ①菌落表面—平滑或具皱纹、致密或疏松、同心环或辐 射状沟纹等；②菌落质地—绒毛状、毡状、棉絮状、羊毛状、束状、绳索状、粉粒状、明胶状或皮革状等；③菌落的边缘—可呈全缘、锯齿状、树枝状或纤毛状等；④菌落高度—扁平、丘状隆起、中心部分突起或凹陷等。 （一）抗原：甘露聚糖Detection of Mannan/Antimannan in Serum of Patients with Invasive Candidiasis 193 patients (392 samples); 43 with IC Sensitivity Specificity Mannan (ag) 40 % 98 % Antimannan (ab) 53 % 94 % ag and/or ab 80 % 93 % （二）抗原：半乳甘露聚糖Serial Aspergillus Galactomannan Screening GM抗原检测用于侵袭性曲霉病诊断 与临床诊断和疗效反应有良好的一致性。 检测方法有ELISA、放射免疫分析（RIA）和乳胶凝集试验等，但敏感性低。 ELISA检测24只兔(王莉，等。2003 ) 敏感性和特异性： 血清 95% 78% 尿液 90% 51.4% 检测曲霉GM抗原的ELISA试验 GM抗原ELISA检测方法（Platelia试剂盒） （三）新生隐球菌乳胶凝集试验 （四）β-1,3葡聚糖 使用仪器及配套试剂盒能快速地检测出血液和体液中真菌β-1,3葡聚糖的实际含量，对真菌的早期诊断具有重要意义。 β-1,3-D-葡聚糖检测阴性是否需要作进一步的复查？  确诊深部真菌感染病人病史調查 真菌分子生物学的鉴定方法 核酸碱基GC比分析 限制性片段长度多态性 Southern印迹分析 脉冲场凝胶电泳（PFGE） PCR 随机扩增多态性 (RAPD) DNA片段测序等 分子流行病学研究 真菌感染检查项目的选择和应用 浅部真菌——直接显微镜检查 深部真菌——标本培养、观察培养物性状并借助理化特性作鉴别。 Direct Examination It is highly recommended that a direct microscopic examination be made on most this provide an immediate presumptive diagnosis for the physician, but it may also aid in the selection of an appropriate culture medium. A phase-contrast microscope is a valuable adjunct in the