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第三节 药品质量标准分析方法验证 一、目的 证明所采用的分析方法适合于相应的检测要求。 ;二、用途 （一）药品质量标准起草时，分析方法需经验证。 （二）药物生产方法变更、制剂的组分变更、原分析方法进行修订时，分析方法需经验证。;三、需验证的分析项目 1. 鉴别试验； 2. 杂质定量或限度检查； 3. 原料或制剂中有效成分含量测定； 4. 制剂中其它成分（降解产物、防腐剂等）的测定； 5. 溶出度、释放度等功能检查中的溶出量等的测试方法。 ;四、验证内容 验证内容有：准确度、精密度（重复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性; （一） 准确度（accuracy） 准确度是指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，用百分回收率表示。 测定回收率R（recovery）的具体方法可采用“回收试验法”和“加样回收试验法”。 ; 回收试验 空白+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M; 加样回收试验 已准确测定药物含量P的真实样品+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M; 数据要求 规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备高、中、低三个不同浓度样品各测三次。;1. 含量测定方法的准确度 原料药可用已知纯度的对照品或样品进行测定，或用本法所得结果与已建立准确度的另一方法测定的结果进行比较。 ; 制剂可用含己知量被测物的各组分混合物进行测定，即采用在空白辅料中加入原料药对照品的方法。 如不能得到制剂的全部组分，可向制剂中加入已知量的被测物进行测定，或与另一个已建立准确度的方法比较结果。; 中药分析的准确度一般用加样回收试验衡量。中药回收率一般要求在95～105%范围内，有些方法操作步骤繁多时，可要求在90～110%范围内。RSD一般在2%以内。 ;2．杂质定量测定的准确度 可向原料药或制剂中加入已知量杂质进行测定。如果不能得到杂质或降解产物，可用本法测定结果与另一成熟的方法进行比较。; （二）精密度（precision） 精密度是指在规定条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。用偏差（d）、标准偏差(SD)、相对标准偏差(RSD)（变异系数，CV）表示。 ;偏差（d）：测量值与平均值之差 ;相对偏差＝允许差：容量分析（中和法、非水滴定法、银量法、络合滴定法、重氮化法、氧化还原法）≤0.3%；重量法≤ 0.5%；氧瓶燃烧法≤ 0.5%；仪器分析≤ 3%、凯氏定氮法≤ 1%;标准（偏）差（SD或S） ;相对标准（偏）差（RSD），也称变异系数（CV） ; 1. 重复性(repeatability):在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度；在规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次或把被测物浓度当作100%，至少测6次进行评价。; 2. 中间精密度 同一实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备所得结果的精密度。 3. 重现性(reproducibility)不同实验室，不同分析人员测定结果的精密度。 数据要求：需报告RD，RSD和可信限。; （三）检测限（limit of detection， LOD） 检测限系指试样在确定的实验条件下，被测物能被检测出的最低浓度或含量。 是限度检验效能指标，无需定量测定，只要指出高于或低于该规定浓度即可。 ;1．非仪器分析目视法 用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或量。; 2．信噪比法 用于能显示基线噪音的分析方法（仪器分析方法），是把已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。一般以信噪比（S/N）3∶1或2∶1时的相应浓度或注入仪器的量确定检测限。 ;（1）空白值＝0时；①测定背景10次以上，求出标准差σb。②将σb乘以三倍；③在工作曲线上求出3σb相对应的浓度Xb；即为方法的检出值；（2）空白值不等于0；①测定背景10次以上，求出标准差σb ；②将σb 乘以三倍；③在工作曲线上求出3 σb 相对应的浓度Xb ；④将求得的对应浓度值加上空白值即得该方法的检出限。;（四）定量限（1imit of quantitation，LOQ） 指样品中被测物能被定量测定的最低量，结果应具有一定准确度和精密度要求。 ; 常用信噪比法确定定量限，一般以信噪比（S/N）为10∶1时相应的浓度或注入仪器的量进行确定，也可按