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PCR不必“摸条件” PCR是分子生物学科研人员必做的实验，为了扩增目的基因，经常要对PCR的体系进行“摸条件”，特别是一些GC含量高的目的基因或者DNA纯度不高的样本! “摸条件”成为PCR实验最费时费力的工作！虽然市场上有很多PCR的MasterMix试剂，将酶、dNTP、反应缓冲液混合在一起，很方便客户的使用，但仅仅是简单的混合，极少公司对MIX的应用范围进行广泛的实验和优化，只能做一些不复杂的PCR。 百泰克通过长时间、无数次的实验优化，终于推出了适用范围广、稳定性良好的PCRMIX，是目前最“傻瓜”的PCR反应体系之一，不论是质粒、菌液、CDNA、基因组DNA、或者是直接裂解的粗提物，GC含量高达75%的模板，都能轻松扩增，不需要费力的“摸条件”！ 本产品包含酶、dNTP、特殊稳定剂和优化的反应缓冲液，浓度为2x。DNA扩增时，只需加入模板，引物和水，使MasterMix溶液的浓度为1×即可进行反应。具有快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。进行PCR扩增可以减少操作时间，避免因多步操作带来的污染，特别适宜高通量筛选基因的扩增 ,Taq PCR MasterMix扩增产物可用于T/A克隆。本产品加入特殊稳定剂，37 ℃温度下48 h仍然保持95%以上的扩增效率．储存条件： -20 ℃一年有效，多次冻融不会影响活性，经常使用可放置于4 ℃。 本品为适应大部分PCR反应需要，Taq 酶量是按照PCR反应酶量上限所加，如出现PCR反应非特异性扩增明显或者背景过高，可将Taq PCR MasterMix反应液适当稀释后使用，可改善PCR扩增效果。 PCR反应液： 组成成分 50 μL体系 2× MasterMix 25 μL 上游 Primer（10 μM） 1-5 μL 下游 Primer（10 μM） 1-5 μL 模板： lamid DNA ～50 ng genomic DNA ～1000 ng 　 cDNA ～500 ng 粗提液 ～2 μL 灭菌蒸馏水至 50 μL PCR扩增实例： 一 plasmid DNA扩增： 1．提取的质粒DNA扩增 以pUC19质粒为模板扩增100，250，500，1000，2000 bp片段，以pBS质粒为模板扩增1500 bp片段。 模板：pUC19质粒30 ng/50 μL or pBS质粒30 ng/50 μL PCR扩增程序： 循环数 Step 温度 时间 1 1 94 ℃ 2 min 　 　 94 ℃ 45 sec 2 55 ℃ 45 sec 3 72 ℃ 2 min 1 1 72 ℃ 5 min 2．质粒菌液直接扩增： 以pUC19菌液为模板扩增100，250，500，750，1000 bp片段，以pBS菌液为模板扩增1500 bp片段。 模板：菌液OD600=0.8时2 μL /50 μL PCR扩增程序：同上a扩增程序同。 结果：Bioteke 2×power Taq PCR MasterMix试剂对于质粒或菌液均可高效率的扩增。取扩增产物10 μL用1%琼脂糖凝胶电泳进行分析可见明亮条带。 二．genomic DNA扩增 1．大肠杆菌DNA扩增 模板：大肠杆菌DNA 50 ng/50 μL PCR扩增程序： 循环数 Step 温度 时间 1 1 94 ℃ 4 min 　 　 94 ℃ 45 sec 2 58 ℃ 45 sec 3 72 ℃ 1.5 min 1 1 72 ℃ 5 min 2．高GC含量的片段扩增 a．人类基因组扩增（GC含量60%） 模板：人类基因组 100 ng/50 μL Primer： PrimerF：5′-GGGAGGGGACCGGGGAACAGAG-3′ PrimerR：?5′-GAACAGTCCGTCACTTCACGTG-3′ PCR扩增程序： 循环数 Step 温度 时间 1 1 94 ℃ 4 min 　 　 94 ℃ 45 sec 2 60 ℃ 45 sec 3 72 ℃ 1.5 min 1 1 72 ℃ 5 min b．菌Streptomyces phaeochromo gene的片段扩增（GC含量70%） 提取菌Streptomyces phaeochromo gene进行PCR扩增 模板：菌Strepto