中山大学考研药物分析资料第四章.docVIP

第四章 药物定量分析与分析方法验证（一） 目的与要求 1、掌握不同结构药物的稳定性规律 2、掌握色谱系统适用性试验的内容 3、熟悉氧瓶燃烧法的实验过程 4、了解定量分析样品的前处理方法的进展及在药物分析中的应用 掌握不同结构药物的稳定性规律 （1）与苯环直接相连，卤原子和苯环形成强共轭结构，电子云密度重新分布，此时卤原子结合牢固，不易脱离；需要破坏后才可分析。 （2）与脂肪链相连，结合不牢固；根据情况选择。 （3）与苄基相连，相当于活泼取代氢的位置，卤原子易脱掉，结合最不牢固，易处理。 2、掌握色谱系统适用性试验的内容 色谱的定量，都需要色谱系统符合一定要求，即要进行色谱系统适用性实验，包括对主要组分的理论塔板数、主要组分与其他组份的分离度，以及重复性和主要组分的峰对称因子（拖尾因子）等。其中分离度和重复性是其中更具实用意义的参数。 （1）、色谱柱的理论塔板数（n）：在规定的色谱条件下（固定相，流动相等），注入供试品溶液或各品种项下规定的内标物质溶液，记录色谱图，量出供试品主成分或内标物质峰的保留时间tR（以分钟或长度计，下同，但应取相同单位）和半高峰宽（Wh/2），按n＝5.54（tR/Wh/2）2计算色谱柱的理论板数，如果测得理论板数低于各品种项下规定的最小理论板数，应改变色谱柱的某些条件（如柱长、载体性能、色谱柱充填的效果等），使理论板数符合要求。 问：为什么不用峰宽来计算理论塔板数？ （2）、分离度（R）：无论是定性鉴别还是定量分析，均要求待测峰与其他峰、内标峰或特定的杂质对照峰之间有较好的分离度。分离度的计算公式为： 式中tR2、tR1分别为相邻两峰中后一峰和前一峰的保留时间；W1及W2为此相邻两峰的峰宽。除另有规定外，分离度应大于1.5。 （3）、重复性：取各品种项下的对照溶液，连续进样3～5次，除另有规定外，其峰面积测量值的相对标准偏差应不大于2.0%。也可按各品种校正因子测定项下，配制相当于80%、100%和120%的对照品溶液，加入规定量的内标溶液，配成3种不同浓度的溶液，分别进样3次，计算平均校正因子。其相对标准偏差也应不大于2.0%。 （4）、拖尾因子（T）：为保证分离效果和测定精度，应检查待测峰的拖尾因子是否符合各品种项下的规定。拖尾因子的计算公式为： 式中 W0.05h为0.05峰高处的峰宽；d1为峰顶点至峰前沿之间的距离。 除另有规定外，峰高法定量时T应在0.95～1.05之间。峰面积定量影响不大，也不应太大 3、熟悉氧瓶燃烧法的实验过程 氧瓶燃烧法：是将含有待测元素的有机药物置于充满氧气的密闭的燃烧瓶中充分燃烧，使得待测元素转化为不同价态的氧化物，被吸收于适当的吸收液中，然后根据待测物质的性质，选用合适的方法进行分析。 本法适用于分析含卤素有机药物、氮、硫和硒等药物。 操作法：在燃烧瓶中加入规定的吸收液，并将瓶口用水湿润；小心急速通氧气约1分钟（通气口接近液面），立即用表面皿覆盖瓶口，备用；点燃包有供试品的滤纸包，迅速放入燃烧瓶中，按紧瓶盖，用少量水封闭瓶口，使燃烧完毕，充分振摇，使生成的烟雾完全吸收入吸收液中，放置15min后，用少量水冲洗瓶塞及铂丝，合并洗液也吸收液。然后用同法做空白试验。 需要注意的问题：（1）氧气要充足！燃烧要充分。（2）瓶中不得有有机溶剂残留！（3）不得有润滑油等涂抹瓶口！ （4）水封瓶口，且用手按住瓶口！（5）选择合适的吸收液（多数是水和氢氧化钠的混合液）（6）若瓶中出现黑色颗粒，则为燃烧不充分。 4、了解定量分析样品的前处理方法的进展及在药物分析中的应用 药物的定量分析，需要根据分析方法的特点、药物的结构与性质，以及药物制剂的处方组成，采用合适的方法对样品进行处理，以满足所选择的分析方法对样品的要求。有些药物可以用相对较简单的方法处理，如化学药单体等；对于药物制剂来说，需要考虑处方中其他组分的干扰（在处理样品过程中除掉干扰，不同于色谱法的分离分析） 本节主要介绍含金属和卤素、硫、磷、硒等特殊元素的药物分析时的前处理过程。这些药物的处理方法需根据它们在分子中结合的牢固程度不同而有所选择。 复习题 1、不同金属或卤素结合类型药物的稳定性？ （1）与苯环直接相连，卤原子和苯环形成强共轭结构，电子云密度重新分布，此时卤原子结合牢 固，不易脱离；需要破坏后才可分析。 （2）与脂肪链相连，结合不牢固；根据情况选择。 （3）与苄基相连，相当于活泼取代氢的位置，卤原子易脱掉，结合最不牢固，易处理。 含金属药物前处理有两种情况： 1）金属原子不直接与碳原子相连，通常为有机酸或者酚的金属配合物，即含金属的有机药物，结合