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园　艺　学　报　2001 , 28 (3) : 211～217 Acta Horticulturae Sinica 程中平1 ,2　陈志伟1　胡春根3　邓秀新3　罗正荣3 (1武汉市林业果树研究所 ,武汉 430075 ;　2中国科学院武汉植物研究所 ,武汉 430074 ;　3华中农业大学 国家作物改良重点实验室 ,武汉 430075) 摘　要 :采用 RAPD技术 ,用筛选的 22个 10碱基随机引物对桃属 203个材料扩增 ,着重 对其中的新疆桃类型进行了分子评价。针对新疆桃分类地位存在的异议 ,认为新疆桃应该是 普通桃内的一个变种。 关键词 :桃 ;新疆桃 ; RAPD分析 ;分类 新疆桃〔Pruns ferganensis ( Kost et Reib) Kov. et Kost〕作为一种重要的种质资源 ,曾 有不少学者对其进行了形态学〔1～6〕、细胞学〔7〕、酶学〔8～10〕、孢粉学〔11～13〕的研究。笔者采 用 RAPD技术 ,对桃的 203个种、变种、杂种、品种进行了分析 ,本文着重对其中的新疆 桃进行分子评价 ,并结合前人的研究 ,对新疆桃分类地位进行探讨。 1　材料与方法 试材编号与名称见表 1 ,其中 G11、G12、G13、G14和 G15为新疆桃 ,前四者采集地 为郑州果树所 ,后者为北京市林果所。 取采集的各桃种质幼嫩叶 1～2片 ,依照史永忠等〔14〕的方法提取 DNA。 应用筛选的 22个引物 (表 2) ,进行 PCR扩增。扩增条件采用经优化的反应体系 , PCR反应的总体积 25μL ,其中含 10×PCR缓冲液 2. 5μL , MgCl2 (25 mmoLL - 1) 2. 0μL , dNTP (2 mmol? - 1) 2. 5μ , Tag酶 (5 UL - 1) 0. 24μ ,引物 (16. 5 ngL - 1) 2. 0μ , - 1 MgCl2、dNTP均购自 Shanghai promega公司。反应液混匀后 ,在其上加一薄层矿物油。PCR 忠等〔14〕采用的参数。扩增完毕 ,在 1. 4 %琼脂糖凝胶上 (西班牙产 ,加含 EB 0. 5μg Ladder Plus作 Marker ,在紫外透射仪上观察 ,照相。 用 Lambda DNA/ EcoR I + Hind和 Gene RulerTM 100 bp DNA Ladder Plus作 Marker ,确定 扩增产物在凝胶上的位置 ,将 PCR扩增中出现的清晰的带记为 1 ,不出现的记为 0 ,录入 用 UPGMA方法聚类 。 收稿日期 : 2000 - 09 - 20 ;修回日期 : 2000 - 12 - 15 基金项目 :武汉市晨光计划资助项目 (985003074) ;华中农业大学国家作物改良重点实验室资助项目 仁提供试材和资料 ,在此一并致谢。 ? 1994-2008 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved.  2　　　　　　　　　　　　　　　园　　艺　　学　　报　　　　　　　　　　　　　　　28卷 表 1　参比桃试材 Table 1　Compared experimented materials 编号 No. 名称 Name 编号 No. 名称 Name F01 F02 G01 G02 G03 G04 G05 G06 G07 G08 G09 G10 G11 G12 G13 G14 G15 G16 H01 H02 H03 H04 H05 I1 I2 I3 I4 I5 I6 I7 I8 I9 I10 J 1 J 2 J 3 J 4 J 5 J 6 J 7 J 8 K1 K2 K3 GF655 GF677 甘肃桃 光核桃 红花山桃 白花山桃 帚形山桃 山　桃 白花山碧桃 陕西桃巴旦 桃巴旦 内蒙古长柄扁桃 喀什 1号 喀什 2号 喀什 3号 喀什 4号 新疆桃 毛　桃 列玛格 阿克拉娃 哈露红 西北利亚 C 贝　蕾 红重瓣 寿　粉 S1 S2 S9 寿　白 白单瓣 粉寿星 寿星桃 (粉红) 寿星桃 (红色) 绛　桃 洒红桃 五保桃 人面桃 绯　桃 红花碧桃 碧　桃 红碧桃 垂枝桃 (江苏) 鸳鸯垂枝 红垂枝 GF655 GF677 Gansutao Guanghetao Honghuashantao Baihuashantao Zhouxingshantao Shantao Baihuashanbitao Shanxitaobadan Taobadan Neimengguchangbingbiantao Kashi No. 1 Kashi No. 2 Kashi No. 3 Kashi