不规则抗体筛查.docVIP

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不规则抗体筛查

不规则抗体检查 不规则抗体检查也称红细胞抗体检查。不规则抗体是指抗 A、抗 B以外的血型抗体。ABO系中的亚型,变异型抗 A1或某种抗B等抗体,也称为不规则抗体。其多为IgG抗体。主要是经输血或妊娠等免疫刺激产生,在盐水介质中不能凝集而只能致敏相应抗原的红细胞,必须通过特殊介质才能使致敏红细胞出现凝集反应。临床上通常所称的“同型血”实际上是指ABO血型系统和Rh血型系统相同,其它红细胞血型系统未必相同。如果交叉配血不仔细,或者只用盐水介质配血,则有可能检查不出ABO血型系统之外的不规则抗体,而此抗体与相应抗原发生免疫反应,可导致溶血性输血反应的发生。 红细胞血型抗体检查适用于下列情况:1、ABO血型鉴定发现受检者血清中有意外抗体时;2、供血者血清抗体筛检;3、输血前受者血清抗体检查;4、输血后溶血反应疑为由同种抗体引起时;5、孕妇血清的抗体检查;6、新生儿溶液血病婴儿血液中抗体检查;7、直接抗球蛋白试验阳性红细胞上抗体的检查。 1. 原理 利用筛选细胞(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)上存在的多种红细胞抗原与被检血清在凝聚胺介质中反应,如果出现凝集表示血清中存在不规则抗体。 2. 试剂 2.1 5%筛选细胞(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ) 2.2 凝聚胺试剂 2.3 直接抗人球试剂 外周血或静脉血 3. 操作步骤 3.1 取试管三支,标明Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ并往各管加病人血清(血浆)2滴,加5%筛选细胞(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)各1滴。 3.2 各加LIM0.7ml,混合均匀后,再各加Polybrene 溶液2滴,并混合均匀。 3.3 用BASO专用离心机1000G离心力,离心10秒,然后把上清液倒掉,不要沥干,让管底残留约0.1ml液体。 3.4 轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集,如无凝集,则必须重作。 3.5 最后加入Resuspending 2滴,轻轻转动试管混合并同时观察结果。如果凝集散开,表示是由Polybrene引起的非特异性聚集,抗体筛检结果为阴性;如凝集不散开,则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应,抗体筛检结果为阳性,应进一步作抗体鉴定。 4. 筛选Ⅰ号细胞,筛选Ⅱ号细胞,筛选Ⅲ号细胞。对应的细胞反应格局表一张。 红细胞血型抗体筛选细胞反应格局表 序 号 RH-hr Kidd MNSs Duffy Diego Kell Lewis P 试验结果 D C E c e JKa JKb M N S s Mur Fya Fyb Dia Dib K k Lea LEb P1 ? ? ? 1 + + 0 0 + + + + + 0 + 0 + 0 0 + 0 + 0 + + ? ? ? 2 + + 0 + + + + 0 + 0 + 0 + 0 0 + 0 + + 0 0 ? ? ? 3 + + + + + + + 0 + 0 + 0 + 0 0 / 0 + 0 + 0 4. 临床意义 虽然不规则抗体筛选阳性率仅为0.37%,但是该项阳性的患者一旦输入具有相应抗原的红细胞,抗原、抗体发生免疫性结合,在补体的参与下,使输入的红细胞发生溶解,即发生溶血性输血反应。患者出现发热、贫血、黄疸和血红蛋白尿,严重时甚至危及其生命。因此,在输血中要经常警惕这种输血反应发生的可能性。当不规则抗体筛选阳性时,必须进一步作抗体鉴定,确定其特异性后,再输入无相应抗原的红细胞,才能达到安全输血之目的。 新生儿溶血病(HDN)也是由于母亲体内存在着与其胎儿红细胞不配合的IgG性质的不规则抗体,引起的同种被动免疫性疾病。凡是以IgG性质出现的不规则抗体,理论上都可以引起HDN,因为IgG性质抗体能通过胎盘进入胎儿血循环,破坏胎儿红细胞,引发胎儿水肿、黄疸、贫血和肝脾肿大,甚至并发核黄疸。因此对有输血史或妊娠史的孕妇也应作不规则抗体筛选,若检测出不规则抗体,应作出相应的预防和治疗。Rh血型中D抗原的抗原性强于E抗原的抗原性,因此产生抗 D抗体的几率大于抗-E抗体。抗 A1抗体为A亚型中不规则抗体,它的存在提示我们在注意ABO血型以外的不规则抗体的同时,也应高度重视ABO亚型中的不规则抗体,因为它也是引起溶血性输血反应的一个因素。抗M抗体为冷凝集素,很少在37℃有活性,一般在体内不能引起溶血反应,但患者处于低温麻醉状态下手术时应注意,因为此类抗体可激活补体。当机体的体温在冷抗体最适反应温度范围内(4~20℃)时,可发生溶血反应。 不规则抗体产生大多为Rh血型系统,除抗D外,其他如抗E,抗Ec,抗Ce检出率占Rh系统67.8%,提示Rh阳性患者输血也可引起溶血反应,且机率较高.根据我国汉族人群Rh抗原分布特点,E抗原阳性比D抗原阳性低,产生抗E抗体的机率高于抗D抗体,故Rh血型系统D抗原阳性E抗原阴性者输血不容忽视.Rh阴性个体免疫后产生抗D的机率为70.9%,产生的抗体其效价在体

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