硅基芯片表面化学性质对蛋白质固定化的影响-IngentaConnect.PDF

理化学学报(Wuli Huaxue Xuebao) October A cta Phys. Chim. Sin., 2010, 26(10) ：2821-2827 2821 [Article] 硅基芯片表面化学性质对蛋白质固定化的影响 周稳稳1,2 廉 洁1,2 胡科家1,2 高云华1, 徐 百1, (1 中国科学院理化技术研究所光化学转换和功能材料重点实验室, 北京 100190; 2 中国科学院研究生院, 北京 100049) 摘要： 制备蛋白质芯片的关键在于将蛋白质固定到芯片表面并保持其生 学活性. 本实验中, 我们分别采用 理吸附、直接化学固定、加入间隔臂化学固定和生 亲和作用固定的方法将癌胚抗原(CEA)抗体固定到硅基芯片 的二氧化硅表面. 基于抗原-抗体的特异性相互作用, 利用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)评价各种方法固定抗 体的效果. 实验结果表明, 在修饰有氨基的表面采用戊二醛作为偶联试剂固定CEA 抗体具有最高的偶联效率, 引入多聚赖氨酸(poly L lysine)作为间隔臂可以显著增强固定效果, 并可进一步降低非特异性吸附. 而利用生 亲和作用固定CEA 抗体也可获得较好的固定效果, 但是非特异性吸附较严重. 关键词： 蛋白质芯片; 抗体固定; 夹心反应; 酶联免疫吸附分析; 氨基表面; 戊二醛; 多聚赖氨酸 中图分类号： O647 Effect of Surface Chemical Properties of a Silicon Chip on Antibody Immobilization ZHOU Wen Wen1,2 LIAN Jie1,2 HU Ke Jia1,2 GAO Yun Hua1, XU Bai1, 1 ( Key Laboratory of Photochemical Conversion and Op toelectronic Materials, Technical Institute of Physics and Chemistry, Chinese Academy of Sciences, Beij ing 100190, P. R. China; 2Graduate University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, P. R. China) Abstract ： The key to constructing a protein microarray is the stable immobilization of proteins and the retention of their biological activities. In this study, immobilization of the carcinoembryonic antigen (CEA) antibody onto a silicon dioxide surface was investigated by physical adsorption, direct chemical covalent conjugation, spacer added chem