朱海平粪便涂片课件.ppt

粪便涂片兰州大学第一医院 检验科朱海平 粪便菌群涂片检查临床意义 粪便中细菌数量、形态种类、比例与肠道菌群处于平衡还是失调状态有着密切的关系 粪便菌群涂片能快速诊断肠道菌群失调，为早期预防、治疗提供线索 菌群失调 概念：指机体某部位正常菌群中菌种间的平衡被打 破，菌种间的比例大幅度变化而超出正常范围的状态。 这种状态进一步发展，机体出现一系列临床病症和体征，称为菌群失调症或菌群交替症 什么会使菌群失调呢？ 菌群失调的原因 抗生素的不合理应用（除抗生素本身毒副作用外）是主要诱因，杀灭致病菌的同时也杀灭有益菌，破坏了正常的微生态平衡，引起菌群失调。 疾病：胃酸缺乏、肝硬化、胃肠肿瘤等； 其他：手术、激素、同位素、放射线和免疫抑制剂的大量使用，都可造成菌群失调 肠道菌群的检测方法 粪便涂片：革兰氏染色—G+紫黑色、G-浅红色 显微镜观察细菌的总数、形态、比例等 培养：需氧菌—埃希氏菌属、沙门氏菌属、志贺氏 菌属等 一、粪便直接涂片的优缺点 1、优点： ①设备简单 ②操作简单 ③时间短 ④形象直观，直接了解粪便菌群的“像”，熟练者对诊断菌群失调有较高的准确性。 2、缺点： ①检验者必须有一定的经验，否则易判断错误 ②主要是定性检查，确定分度较困难。 二、操作技术 1、涂片 ： ?将新鲜大便多处沾取直接涂抹在洁净的玻片上，粪便不可稀释以防细菌变形。标本务求新鲜，涂片厚薄适宜 2、外观 ?： 肉眼检查外观颜色、形状（若含有膜状物的大便应补做艰难梭菌培养） 3、镜检 ?： 染色技术是诊断准确成功的关键，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌要对比鲜明。镜检时应将涂片视野全面观览，切不可看几个视野就计数或报告 三、检查方法 1、细菌总数 观察菌群涂片首先要总览细菌总数，通过“比例概数法”进行判断。 了解涂片上细菌的数量是增多还是减少，有无优势菌或真菌。细菌总数过多的情况较少见或不易引起重视，菌群失调时细菌总数多在正常、减少或消失。 2、观察革兰氏阳性、阴性杆菌及球菌的比率改变 G+杆菌 ：G-杆菌：G+球菌 ：G-球菌（包括球菌/杆菌）比率反映了粪便菌群的质素，它一般不受粪便稀释或浓缩的影响，所以较细菌总数有更大的意义，更能反映菌群的本质和预后。 3、计数方法 选定有代表性视野中的部分区域作细菌分类计数，需要数100～200个细菌以求得比例。不同年龄的人的比例都不一样，一般杆菌与球菌比例约为75：25。 各年龄组细菌比率平均值的正常参考值（%） 年龄 ? G+杆菌 ? G-杆菌 G+球菌 G-球菌 1d： ? ? 30.7—61.5 ? ? 38.5—60.9 ? ? ? ?0—2.2 ? ? 0—0.012d： ? ? 60.0—71.6 ? ? 34.8—36.9 ? ? ? 3.0—3.5 ? ? ? ? 0—0.013d： ? ? 66.9—82.7 ? ? 16.0—31.4 ? ? ? 1.3—1.6 ? ? ? ? 0—0.055d： ? ? 85.5—87.51 ? ? 11.0—12.8 ? ? ??1.4—1.7 ? ? ? 0.08—0.4半年： ? 82.1—96.4 ? ? 2.3—15.8 ? ? ? 0.5—2.6 ? ? ? ? 0.2—1.11岁： ? ? 78.4—94.5 ? 3.5—16.6 ? ? ? 1.5—2.6 ? ? ? ? 0.3—1.75岁： ? 51.7—86.3 ? ? 10.6—37.7 ? ? ? 2.0—13.2 ? ? ? 1.1—5.410岁： ? 56.7—88.5 ? 7.6—30.7 ? ? ? 2.5—12.2 ? ? ? 2.0—6.718—25岁： 54