ELISA和GICA在食源性致病菌检测中的应用-广东环凯微生物科技.PDF

566 ofHealth 17 No3 中国：Ij!生检验杂志2007年3月第17卷第3期ChineseJournal laboratoryTechnology，Mar2007；Vol 【综述】 ELISA和GICA在食源性致病菌检测中的应用 吴清平1，王大鹏1’2…，杨宁4，张菊梅1 3．中国科学院研究生院，北京100049；4．广东环凯微生物科技有限公司，广州510070) [关键词]ELISA；GICA；食源性致病菌；应用 [中图分类号]R446．61 [文献标识码]A [文章编号】 近几年，中国疾病预防控制中心营养与食品安全所对全 表1 3种ELISA方法的优缺点比较 国部分省市的生肉、熟肉、乳和乳制品、水产品、蔬菜中的致病 菌污染状况进行了连续的动态监测，结果表明，微生物源性食 物中毒占居首位，高达39．62％u1。微生物性食品污染包括细 菌性污染、病毒污染和真菌及其毒素的污染等。针对不同的 检测对象，微生物源性食品污染的检测方法很多，如传统的细 菌分离培养法、多聚酶链式反应(PCR)、生物芯片技术和免疫 学检测技术等。随着免疫学检测技术研究的飞速发展，酶联 1．1 沙门茵的检测 免疫吸附试验(ELISA)和胶体金免疫层析技术(GICA)以其简沙门菌是常见的重要食源性致病菌之一，可以污染鲜牛 便、快速、灵敏、成本低、检测谱广等特点在食源性致病菌检测 奶、熟食制品等，对其检测方法的应用研究也较多。田银芳 方面的应用也越来越受到人们的青睐。 ELISA和GICA是以抗原抗体特异性反应为基础而建立 与常规方法相比，该方法的敏感性和特异性分别为100％和 起来的一种检测方法。该方法利用已知抗体或抗原来检测相 应抗原或抗体，可以进行定性和定量检测。由于该技术具有 高度敏感性和特异性的特点，故可用于测定样品中微量的抗 原和抗体。最常用提高检测敏感度的方法是放大免疫反应信 门菌属有高度的特异性且对A—F群代表菌株的最小检出量 号，即标记抗体技术，对抗体进行酶、荧光或放射性标记。当 为106 前，在各种免疫诊断技术中标记抗体技术已成为发展快、应用 法相比的优势。另外，还有研究者将其他分离技术与ELISA 广的一个重要领域嵋o。ELISA和GICA在食源性致病菌的检 o 结合起来以缩短检测周期和降低检测限。MansfieldLP等M 测中所起的作用也越来越重要，如用于检测沙门菌(Salmonel— 将免疫磁珠分离技术与ELISA联合起来建立一个检测系统。 coli la)、大肠杆菌0157(Escherichia0157)、单核细胞增生李斯 cfu／25 该系统对生鸡肉和饲料的检测限为2×103 g，整个检测 特菌(Listeriamonocytogenes)和黄曲霉毒素Bl及Ml(Aflatoxin 过程耗时不足27h，其中包括18h传统的前增菌和6h葡萄 BlAflatoxinM1，AFBAFM)等。 糖营养肉汤培养的样品预处理过程；而传统方法需要72— 96 h。这对于快速检验是一个很好的尝试。 1 ELISA及常见致病茵的检测 1．2大肠杆菌0157的检测 ELISA是一种非放射性标记免疫分析技术。20世纪70大肠杆菌0157也是