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实验七 茶碱体内动力学参数的测定 （血药浓度法） 【目的】1．通过测定茶碱体内动力学参数，掌握血药浓度数据法。 2．通过药物口服吸收实验，掌握计算茶碱在家兔体内的K、ka、tmax、Cmax等参数的方法。 【基本概念和实验原理】 当药物按表观一级吸收过程进入体内，又按一级过程消除，且在体内按单室模型分布时，下述微分方程式成立： dX/dt= ka Xa-KX (1) 式中：X——血管外给药后时间的体内药量； K——药物的表观一级消除常数； ka——表观一级吸收速度常数； Xa——吸收部位的药量。 对该方程求解并写成浓度表达式有： C=〔kaFX0/V( ka－K)〕(e－Kt－e－Ka t ) (2) 式中:C——任意时间血浓度； X0——给药剂量； F——吸收分数； V——表观分布容积。 对于大多数药物，一般有ka＞K，于是，当t比较大时，e－kt 将趋于零， 式（2）简化为： C=〔kaFX0/V( ka－K)〕e－kt （3） 用常用对数表达为： ㏒C=－Kt/2.303+㏒〔kaFX0/V( ka－K)〕 (4) 该式表明对数血药浓度—时间曲线的吸收后相为一直线。从㏒C—t图形上的直线斜率咳求算消除速度常数K和消除半衰期t1/2表： K=－2.303×b (5) t1/2=0.693/K (6) 吸收速度常数ka则可以用残数法求算，将式（2）移项得： 〔kaFX0/V( ka－K)〕e－kt－C=〔kaFX0/V( ka－K)〕e－ka t （7）kaFX0/V( ka－K)〕e－K t =C/ （8） 则有 C/－C=〔kaFX0/V( ka－K)〕e－Ka t （9）ka t/2.303+㏒〔kaFX0/V( ka－K)〕 (10) 将实验中对数血药浓度—时间曲线的尾段直线外推至纵轴，则吸收期中各时间在该直线上相应的浓度即为C/，C即为对应时间的实测血药浓度值，故用各个㏒（C/－C）值对t作图时，即得第二条直线，称为残数线，其斜率为－ka /2.303，由此求出ka值。 将式（2）中的t从0→(积分，即得血药浓度—时间曲线下的面积： AUC=〔kaFX0/V( ka－K)〕〔1/K—1/ka〕 （11） 式中：kaFX0/V( ka－K) 即为吸收后相直线或残数线截距的反对数。 血药浓度峰值（Cmax）的到达时间即峰时（tmax）分别是： tmax =（㏑ka—㏑k）/（ka—K） （12） Cmax =（ FX0/V）ek tmax (13) 或Cmax =截距的反对数×〔(ka－K)/ ka〕e－K tmax (14) 【材料】 动物：家兔 器材： 方法①紫外分光光度计，旋涡混合机，离心机，带塞离心管（5ml,10ml）细量管0.25ml,0.5ml,1ml,5ml）,滴管，家兔固定木盒，红外灯，注射器（5ml）灌胃器，刀片，棉球，搪瓷盘，试管架等。 方法②Lincrospher-C18柱（江苏淮阴）,预柱C18 ；流动相：甲醇∶水=32∶68；流速=1.0ml/min;检测波长275nm. 药品： 方法①茶碱溶液（4mg/ml）,0.1mol/LHCL,氯仿—异丙醇(9.5:0.5);0.1mol/LNaOH,75%乙醇等。 方法②茶碱标准溶液：（1.omg/ml;0.10mg/ml;0.01mg/ml, 0.001 mg/ml）, 咖啡因内标液：（1.048mg/ml等。 【方法】 1、标准曲线制备 方法①配制25(g/ml浓度的茶碱贮备液，分别吸取适量，并加蒸馏水稀释至1.0ml，是标准系列浓度为0、0.5、2、4、6、8、12、16和25(g/ml ，各加入兔血清0.5ml、0.1mol/L盐酸0.2ml于旋涡混合器上混匀后，再各加氯仿—异丙醇(9.5:0.5)混合液5.0ml，密塞，混匀2分钟，2500rpm离心20分钟。精密吸取下层液4.0ml，加等量的0.1mol/LNaOH溶液，混匀2分钟，2000rpm离心10分钟。取上清液在紫外分光光度计上于波长274nm及298nm处测定吸收值，以两波长吸收值的差值对浓度计算标准曲线方程。 方法② 取标准血浆0.5ml于1、2、3、4、5号离心管中，分别加入茶碱标准储备液（0.1mg/ml）使浓度依次为5.0、10.0、15.0、20.0、25.0μg/μ