冠心七味片提取工艺优选.docVIP

冠心七味片提取工艺优选【摘要】目的 确定冠心七味片的提取工艺。方法 采用正交试验法，以丹参素浸出量为评价指标，考察乙醇浓度、溶媒用量及提取时间对有效成分提取量的影响，优选出合理的提取工艺。结果 冠心七味片的最佳提取工艺条件为：以95%乙醇10倍量为溶媒；70%乙醇8倍量为溶媒，8倍量水为溶媒，提取2.0小时。结论 试验结果为确定该产品的提取工艺提供了实验依据。 【关键词】冠心七味片 正交设计 提取 丹参素 中图分类号：R943文献标识码：B文章编号：1005-0515（2010）11-225-02 冠心七味片是有丹参、沙棘等7味中药组成，临床用于冠心病，心烦心悸，心绞痛等症的中药制剂。本文以提取部分主要有效成分丹参素为指标，对冠心七味片片提取工艺进行了考察。 1 仪器与材料 TSP100型高效液相色谱仪（美国），DZF-4型真空干燥箱（上海医用恒温设备厂），T328A型电光分析天平（上海天平仪器厂），AS3120超声波仪；丹参素钠对照品（中国药品生物制品检定所），甲醇、乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。 2冠心七味片提取工艺的优选 2.1 丹参素的测定：照高效液相色谱法（中国药典2000年版一部附录ⅥD）测定。 色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-乙腈-磷酸三乙胺水溶液（5:2:93）为流动相；检测波长为281nm。理论板数按丹参素峰计算应不低于5000。 对照品溶液的制备：精密称取丹参素钠对照品适量，置棕色瓶中，加甲醇溶解，制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。 供试品溶液的制备与测定：取本品干浸膏，研细，精密称取约0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，称定重量，超声处理20分钟，取出放冷，称重，用甲醇补足损失的重量，充分摇匀，滤过，滤液经微孔滤膜（0.451μm）滤过，滤液置棕色瓶中备用，即得。 测定法： 别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得。 2.2试验设计：采用正交试验法对该产品的提取工艺进行优选。选择提取溶媒、溶媒用量、提取时间作为考察因素，以提取物种丹参素的量作为评价指标，用L9(34)正交表安排试验。所选用因素水平及正交试验方案见表1、表2。 表1提取工艺优选因素水平表 2.3方法与结果：称取丹参粗粉9g，广枣和沙棘各3g，共15g为1份，共称9份。照“正交试验设计表”（见表2）的安排，加溶媒分别提取，合并一、二次提取液回收乙醇后得到的稠膏与第三次提取浓缩的稠膏合并，干燥后再分别按前述方法测定，根据干浸膏的重量计算出提取物中丹参素的量见表2。 表2提取工艺条件优选正交试验表及结果 对表2的分析可知，以提取物中丹参素的量为评价指标，最佳提取工艺条件为A1B3C2，各因素的主次顺序为A，C，B，其中A因素经方差分析，表明对丹参素的量有显著影响（见表3），因此方案A1B3C2为该品种提取最佳方案。 表3 方差分析表 2.4验证实验：由于所选的方案是正交表中没有的方案，故需要做实验予以验证。 取与上述正交试验同批次的丹参粗粉9g，广枣和沙棘各3g，共15g为1份，按A1B3C2进行提取，其余操作同上，结果丹参素分别为17.35mg，18.21mg，16.88mg。与正交试验表中的试验结果（表2）进行比较，可认为验证试验结果较为满意。因此，确定该品种的最佳提取工艺条件为A1B3C2，即提取三次溶媒为95%乙醇，70%乙醇，水；加溶媒量分别为10倍，8倍，8倍；提取时间为2.0h，2.0h，2.0h。 注：磷酸三乙胺水溶液配制方法：取蒸馏水约800ml，置1000ml量瓶中，精密加入磷酸1.70ml，旋摇，精密加入三乙胺1.80ml，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，即得。 1