_型登革病毒非结构蛋白1特异性T细胞系的构建和特征分析_杨小猛.pdfVIP

中华临床医师杂志( 电子版) 2012 年 8 月第 6 卷第 16 期 Chin J Clinicians( Electronic Edition) ，August 15 ，2012 ，Vol． 6 ，No． 16 ·462 1 · · · 论著 Ⅱ型登革病毒非结构蛋 白 1 特异性 T 细胞系 的 构建 和特征分析 杨 小猛 江丽芳 赵丹 尹悦 方丹云 【 】 ( DENV2) 1( NS1) T ， 摘要 目的 构建 Ⅱ型登革病毒 非结构蛋 白 特异性 细胞系 分析其抗原特异 、 。 NS1 BALB / c ， 性 表型特征和细胞 因子分泌能力 方法 蛋 白与弗氏佐剂乳化后腹腔注射免疫 小 鼠 取其脾 T ， C NS1 ， 细胞分离 细胞 加入丝裂霉素 预处理 的同系小 鼠单核细胞和 蛋 白 体外循环 间歇刺激和有 限稀释培 DENV2 NS1 T ，MTT ， ，ELISA 养获得 特异性 细胞 法分析其抗原特异性 流式细胞术分析其表型特征 法分析其 。 9 DENV2 NS1 T ， 95% ; 细胞 因子分泌能力 结果 共获得 株 抗原特异性 的 细胞 其纯度和活细胞率均大于 ， T NS1 与胎牛血清刺激培养 比较 该抗原特异性 细胞在 特异性刺激和植物血凝素非特异性刺激下均 明显增 ( t = 6. 2780 ，P ＜ 0. 05; t = 5. 1176 ，P ＜ 0. 05) ， DENV2 E ; T 殖 而在 非特异性刺激下无 明显变化 与 同系小 鼠 细 ， NS1 T FasL( t = 30. 3652 ，P ＜ 0. 05) ; 6 h 12 h ，NS1 胞比较 九株 特异性 细胞均高表达死亡配体分子 培养 和 时 T IL-2 、IL-4 、IL-10 、IFN- TNF- ; IFN- ，6 h 特异性 细胞培养上清 中 γ 和 α 浓度均 明显升高 其 中