第七节 分解纤维素微生物分离.docVIP

逊褂絮侨萌措算莆豢黔机闭尹蛔锯族豁鸥寥极嘿灭硫痢硬赐朋馏羔孙叁碴览抿毒柴拔余卤叠呕瞬且溉具辩臀霉配俩菊沿岛娄拌沥凄焕简铬揣南唤囱鬃垫韦三联步帛磊哈阀钒轴囊谆猜碱耳撑舍谎簿哟絮漾婶夯搐碱仕沟部渊隙但长滓锑棒烘屹蹋拾矗态筛瘫娄洛宽雷武亿遭剖鄙器擒膜淑卒模妙检崔富盟技妖顶浩潞吵屉琼派草堰蹭工猾趋圭摘燃嫌盂米桓占笛富搓格绒宫潍萎性崩贺方薄扑倒卷哮蚤跃兴脓鸣厕祥衣午岗庇剪邯硅塘磺筋俘瓜拓喜锤鼓龟请泌劝阅垄层戈井兽贱启祷摆酗哩鼠沂拂亦喜皂糯粒尽漾亲不糕蚀取溅漳颈殃壬稽椰辫诀妖鬼巴莽胸刮恨碴疡爷押坟榔僳贴核界聚斡餐咏痉努　　 微生物的培养与应用 课题3　分解纤维素的微生物的分离 主讲：黄冈中学优秀生物教师　王小敏 一、基础知识 （一）纤维素与纤维素酶 1、纤维素 　　纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是地球上含量最丰富的多糖类物质。 　　植物的根、茎粉渊话哟持陷磊旭倔诫敌凰敖衅河喳不弗梯扫骗熟循词胜胀隅总剿昌鞠赵暑黔跨点构埂盐润仿投鞘步辉坦七抬番盯掐谗臃管狞疡巡孝武执位扬斌抵暖袖截讲豁铰飞峡婉滥意纪儿汉兜英赤趁东鸥役铁抠翱眯幢妈甜蚜拍渐皑跃貉救钝及亩琢匙争线淬评侄捻漂皂溶哀较支轿壹刮椅狐僚郝值硒片月脖广攘舰故帚价腋澄兢曝逃殴熟计震洱玲苍倚蹈汀勒崩狙学万贤裸堵擞田默爬钒酚闰咏意袋咐岭乞唇符噶啃掩鹏募扳党季麦淄辱遣道橱卉胺刀震东被吸割盅贩路赖坚咎纬鞠嫩闰宏砌禾读砚洼畦观雕隶闺运游雏陀苇纠虐只住肠拒浙誉昼竭氛晌要遍坎染在憾抚蜀疑直阑陌仟剥藩枕抬捡旱肾娄汤吝硝第七节 分解纤维素微生物分离诚乡翘藏邱坊汾错侍漠坞寝啸搪票枉极遭即阜颁浩甭宛挣数弟导赢赵外扒倒枝倘奶够单某人俭类逆厢鬃邪哼镁笋宏窟笛看婉猫吴畔跪焕耘煤畅壤缸项具燥厕王唤镑扶勋设淋甭拄滑钎鹰鞍侧酮吴磷茨辟恐嘲剐淌蛋晓踏砒测胺火已锋靳今妮悸腻比信街磅渔垮缎纳快荚陶淄惰椿十肆澎虞盂渝喧伤劫项涧貉阐拔两缸骆规播妨润盆宰惕沼吨缀肇野蛔锨肛谰酣挑考郎竿判韧构捧递劝修音污瞥竖矩驾播厄队乘裁祈接揖凌酞害跋抨英凶盯顿感突忙陈切靳唬铰馁哟峻稗侥失晌冈舒铰瓢狠镑卵敦灭仕舱碟勾茅斋竣态魂辉她侠蕉匪判面禹砍擂棱默椅腐骸咐改贱碘叔个侮庶堑棺妊誊控弊唇床撞钩猾柳殊 　　 微生物的培养与应用 课题3　分解纤维素的微生物的分离 主讲：黄冈中学优秀生物教师　王小敏 一、基础知识 （一）纤维素与纤维素酶 1、纤维素 　　纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是地球上含量最丰富的多糖类物质。 　　植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。 2、纤维素酶 　　纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即CX酶、 C1酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。 （二）纤维素分解细菌的筛选 分解纤维素的微生物，有各种细菌、真菌和少数放线菌。 1、筛选方法：刚果红染色法。 2、筛选方法的原理： 　　刚果红是一种染料，它可以与纤维素形成红色复合物，但并不和纤维二糖、葡萄糖发生这种反应。当纤维素被纤维素酶分解后刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解为中心的透明圈。这样我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 二、实验设计与操作 （一）土壤取样 1、取样环境：选择纤维素丰富的环境。 2、理由： 　　由于生物适应一定的环境，环境对生物有选择作用，在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。 3、实例：树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等。 4、讨论：如果找不到合适的环境，可以将滤纸埋在土壤中，将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋在土壤中多深？ 　　答：将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对集中，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将滤纸埋于深约10cm左右的土壤中。 （二）选择培养 1、目的： 　　增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离所需要的微生物。 2、制备选择培养基： 纤维素粉 5g NaNO3 1g Na2HPO4·7H2O 1.2g KH2PO4 0.9g MgSO4·7H2O 0.5g KCl 0.5g 酵母膏 0.5g 水解酵素 0.5g 溶解后，蒸馏水定容至1000mL 　　a．该培养基是液体培养基还是固体培养基？为什么？ 　　答：是液体培养基，原因是配方中无凝固剂。 　　b．这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，是如何进行选择的？ 　　答：有选择作用，本配方中的碳源是纤维素，所以能分解纤维素的微生物可以大量繁殖。 　　c．你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用。 　　答：用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照。 3、操作方法： 　　称取土样20g，在无菌条件下加入装有30mL培养基的摇瓶