龙眼组织总RNA提取与纯化方法的研究.pdfVIP

2008年2l卷3期 西 南 农 业 学 报 V0L 2l Nn 3 Southwest China Journal of A cultural Sciences 745 文章编号：1001—4829(2008)03—0745—04 龙眼组织总RNA提取与纯化方法的研究 叶开玉，卢美英 ，于 萍，陈殿余 (广西大学农学院。广西南宁 530004) 摘 要：针对龙眼组织富含多糖、单宁、色素及酚类物质的特点，采用改良的SDS法和CTAB法进行龙眼顶芽、叶片和茎皮3种组织 总RNA的提取与纯化研究。结果表明。两种方法提取的总RNA均具有28、l8、5S 3条清晰、完整的条带，且无降解现象；A26o／A280 均介于1．8-2．0之间。A260／A230均大于2．0。说明改良的SDS法和CTAB法提取的总RNA具有很高的纯度。可以满足后续分子 生物学研究的要求。 关键词：龙眼；总RNA；提取与纯化；改良SDS法；改良CTAB法 中图分类号：S667．2 文献标识码：A Two efficient method for extraction and purification of total RNA from tissues of longan YE Kai—yu。LU Mei—ying’，YU Ping，CHEN Dian—yu (CoHege of Agriculture，Guangxi University，Guangxi Nanning 530004．China) Abstract：Because longan tissues are rich in polysaccharides，polyphenol compounds，tannin and some other secondary metabolites，the SDS method and CTAB method were impwvod to conduct extraction and purification of toatal RNA from tissues of longan tissues．The results indi— catod that the RNA isolated by the improved RNA isolation method showed clear bands of28，18 and 5S rRNA。and the value of OD260 rim／ OD2ao nm were between in 1．8 and 2．0．These results demonstrate that the quality and purity of the RNA obtained by the two improved RNA isolation methods Can meet the demands of molecul~biology experiment． Key words：Longan；total RNA；extraction and purification modified；SDS method；modified CTAB method 提取高质量的RNA是进行Northern分析、RT— RNA提取常用的SDS法和CTAB法 。。，不仅成功 PCR以及构建cDNA文库等分子生物学研究的前提 地从龙眼顶芽、叶片中提取到纯度高、完整性好的总 和基础。龙眼为无患子科龙眼属植物，其组织内富 RNA，而且对茎皮这种较老组织也有很好的提取效 含多酚、蛋白质、多糖、单宁、色素等干扰物质-l J， 果。 这些物质不仅影响RNA的提取效率，而且严重干扰 1 材料与方法 后续逆转录反应和PCR扩增 J。目前，我国龙眼研