利用酵母双杂交研究铜绿微囊藻生物钟蛋白k aib 的自身相互作用.pdfVIP

利用酵母双杂交研究铜绿微囊藻生物钟蛋白k aib 的自身相互作用.pdf

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利用酵母双杂交研究铜绿微囊藻生物钟蛋白k aib 的自身相互作用

KaiB 郑锦乾, 徐 虹, 章 军, 王 靖, 朱斌琳 ( , , 361005) : 从铜绿微囊藻( M icr ocy st is aerug inosa) PCC7820 中克隆了生物钟基因k aiB, 并将其克 隆入酵母双杂交系统的两 个质粒 GADT GBKT 中经测序验证后, 将重组质粒 7 7 GADT ka iB GBKT ka iB 转化酵母菌AH 109 进行自激活性 自身相互作用的检测 7 7 验证结果表明, 铜绿微囊藻生物钟蛋白 KaiB 无自激活性, KaiB 蛋白自身能发生相互作用 因此, 可用KaiB 蛋白为诱饵利用酵母双杂交系统筛选文库钓取与 KaiB 发生相互作用的蛋 白 : ( M icr ocy st is aerug inosa) ; KaiB; ; : Q78 : A :2006) 08004 105 k aiABC( GenBank accession number: DQ156152) [ 1,2] , KaiA KaiC , ( Sy nechococcus KaiB , KaiB , elong at us ) PCC7942 , PCR Southern 40 KaiB [3,4] , , KaiB ka iABC, 3 k ai A, ka iB, k aiC , ka iA ,k aiB, k aiC , 1 材料与方法 KaiA, KaiB, KaiC , [ 1~ 3] KaiC 1. 1 质粒 , MD18TVector Takara , UC19 , KaiA KaiB ; KaiC KaiA KaiC GADT 7, GBKT7, GADT 7T , GBKT753, G , KaiC , KaiB BKT7Lam Clontech ; MD18Tk aiB, KaiC , KaiA GADT 7k aiB, GBKT7ka iB [ 5~ 8] KaiC , KaiC 1. 2 菌株 E scher ich ia coli DH5 ( ) ; AH109 CLONTECH , [9] , ; PCC7820 [ 10] 1996 Sato (M icr ocy st is aer ug inosa) : : , : ( : ( 1976) , , , , : ; , , Em ail: xu , hongx m@ sohu. com 41 Marine Sc

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