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2017-09-02 发布于天津
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鸡传染性支气管炎病毒hh06株膜蛋白多克隆抗体制备及生物学功能研究

第45卷第10期东北农业大学学报 45(10):57~63 2014年10月 JournalofNortheastAgriculturalUniversity Oct.2014 网络出版时间2014-10-21 11:33:33 [URL]/kcms/detail/23.1391.S1133.001.html 鸡传染性支气管炎病毒HH06株膜蛋白多克隆抗体制备及生物学功能研究 1 1 1 1 1 1 李广兴，杜威威，韩溪，潘龙，王新，白妍， 1, 2 1 1 1 洪琴，马玲，任晓峰，杨贵君（1.东北农业大学动物医学学院，哈尔滨 150030；2.上海药明康德新药开发有限公司，上海 200131 ）摘要：文章通过RT-PCR方法扩增传染性支气管炎病毒（IBV）HH06株M全长基因，经抗原性和亲水性分析，将M部分序列成功亚克隆于pET-30a（+）和PVAX1载体中。将阳性重组质粒pET30a-M转化E.coli Rosetta （DE3）感受态细胞，诱导表达获得20ku重组M蛋白。Westernblot检测表明，重组蛋白能够与IBV参考阳性血清反 18 应。以纯化重组M蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体，其ELISA效价达到12 ；Westernblot结果证实，其具有良好的反应性和特异性。间接免疫荧光试验表明，抗M蛋白多克隆抗体可检测到PVAX-M1转染BHK-21细胞表达的M蛋白，与IBVHH06毒株具有很好的特异性反应。病毒感染抑制试验表明，多抗血清对IBVBeaudette株的抑制率可达到25.9%。为IBV检测及M蛋白功能的研究奠定基础。关键词：传染性支气管病毒；膜蛋白；多克隆抗体；间接免疫荧光试验；免疫印迹试验 + 中图分类号：S831；S432.4 1 文献标志码：A 文章编号：1005-9369（2014）10-0057-07 李广兴, 杜威威, 潘龙, 等. 鸡传染性支气管炎病毒HH06 株膜蛋白多克隆抗体制备及生物学功能研究[J]. 东北农业大学学报, 2014, 45(10): 57-63. Li Guangxing, Du Weiwei, Han Xi, et al. Preparation of polyclonal antibody against recombinant M protein of IBV HH06 strain and biological function[J]. Journal of Northeast Agricultural University, 2014, 45(10): 57- 63. (in Chinese with English abstract) PreparationofpolyclonalantibodyagainstrecombinantMproteinof