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晚期糖基化终末产物可通过调节V-ATPase a3与ClC-7影响 破骨细胞的泌酸功能 王海兴1，李子卿1，肖胤勃1，张紫机1，张阳春1，杨 兴1，李朝红2，盛璞义1 (1中山大学附属第一医院关节外科，广东省广州市 510080；2中山大学中山医学院组织胚胎学教研室，广东省广州市 510080) 引用本文：王海兴，李子卿，肖胤勃，张紫机，张阳春，杨兴，李朝红，盛璞义. 晚期糖基化终末产物可通过调节V-ATPase a3与ClC-7影响破骨细胞的泌酸功能[J].中国组织工程研究，2017，21():1826-1832. DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2017.12.004 ORCID: 0000-0001-8555-4827(王海兴) 文章快速阅读： 文题释义： 晚期糖基化终末产物：晚期糖基化终末产物是在非酶促条件下，蛋白质、脂类或核酸等大分子物质的游离氨基与还原糖的醛基经过缩合、重排、裂解、氧化修饰后产生的一组稳定的终末产物。随着人体的衰老，晚期糖基化终末产物会在组织中累积，对正常的生理活动造成影响。 破骨细胞泌酸：破骨细胞对骨吸收坑的酸化是骨吸收进行的重要条件。当成熟的破骨细胞黏附在骨表面后，其通过细胞褶皱缘上的质子泵V-ATPase和氯离子通道ClC-7向骨吸收坑内分泌H+和Cl-，在细胞与骨表面之间形成酸性的骨吸收微环境，这种酸性微环境对于骨矿物质的溶解及有机骨基质的降解非常重要。 摘要 背景：晚期糖基化终末产物对破骨细胞骨吸收功能的影响存在争议，作者的前期研究表明晚期糖基化终末产物作用于破骨细胞前体可显著抑制骨吸收功能，但关于其对破骨细胞泌酸功能的影响尚不明晰。 目的：探究晚期糖基化终末产物对破骨细胞泌酸功能的影响及其机制。 方法：以15 μg/L的RANKL对破骨细胞前体RAW 264.7进行定向诱导正常组，实验组中另加入50400 mg/L不等的晚期糖基化终末产物及对照用牛血清白蛋白(100 mg/L)。通过骨吸收实验验证晚期糖基化终末产物对骨吸收的抑制效应，并以吖啶橙染色观察晚期糖基化终末产物对破骨细胞泌酸功能的影响；进一步检测质子泵V-ATPase a3及氯离子通道ClC-7的表达情况，分析晚期糖基化终末产物影响破骨细胞泌酸的相关机制。 Advanced glycation end products modulate osteoclastic acidification by inhibiting the expression of V-ATPase a3 and ClC-7 Wang Hai-xing1, Li Zi-qing1, Xiao Yin-bo1, Zhang Zi-ji1, Zhang Yang-chun1, Yang Xing1, Li Chao-hong2, Sheng Pu-yi1 (1Department of Joint Surgery, the First Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Guangzhou 510080, Guangdong Province, China; 2Department of Histology and Embryology, Zhongshan School of Medicine, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510080, Guangdong Province, China) Abstract BACKGROUND: The effect of advanced glycation end products (AGEs) on bone resorption is controversial. Our previous study has shown that bone resorption is significantly inhibited when AGEs present with pre-osteoclast cells RAW 264.7, while the effect of AGEs on osteoclastic acidification remains unknown. OBJECTIVE: To investigate the effect of AGEs on osteoclastic acidification and the underlying mechanism. METHODS: RAW 264.7 cells were induced by RANKL (15 μg/L; normal group) to generate osteoclasts, and