LPS对大鼠星形胶质细胞HSPAl2B表达的影响.pdfVIP

工 萍等 LPS对大鼠星形胶质细胞 HSPAI2B表达的影响 第 10期 · 1033 doi：10．3969／j．issn．1000-484X．2013．10．005 LPS对大鼠星形胶质细胞 HSPA12B表达的影响 王 萍 沈爱国 (浙江省绍兴市人 民医院 浙江大学绍兴医院输血科，绍兴 312000) 中国图书分类号 R392．12 文献标识码 A 文章编号 1000-484X(2013)10-1033-05 [摘 要] 目的：探讨内毒素脂多糖 (“p叩olysaechaTide，LPS)对大鼠星形胶质细胞热休克蛋白AI2B(Heatshockproteins A12B，HSPA12B)表达变化和细胞定位的影响。方法：用不同浓度 (0．ol、0．1、1、10 m1)和同一浓度 (1xIg／m1)不同时间 (1、2、4、6、8、12、24小时)的LPS刺激星形胶质细胞，分别用RT—PCR和Westernblot法检测星形胶质细胞 HSPA12B的mRNA 和蛋白质水平表达情况 ，间接免疫荧光双标法检测HSPA12B在星形胶质细胞中的细胞定位。结果：用LPSl g／m1刺激 1小 时后．HSPA12BmRNA的表达增加 ，4小时表达活性最高。HSPA12B蛋白水平表达变化与mRNA水平变化相一致。免疫细胞 化学证明LPS诱导星形胶质细胞 HSPA12B的表达定位在胞核。结论：LPS可诱导星形胶质细胞 HSPA12B表达上调。HS PAI2B可作为一种炎症反应蛋 白参与炎症反应过程。 [关键词] 脂多糖；星形胶质细胞；热休克蛋白A12B EffectofLPS ON HSPA12B expressionin ratastrocyte WANGPtng，SHENAi—Guo．BloodTransfusionDepartmentofShaoxingPeoplesHospital，ShaoxingHospitalofZhe— jiangUniversity，Shaoxing312000，China [Abstract] Objective：Toexploretheeffectoflipopolysaccharide(LPS)onthechangesoftheexpressionandintracellularlo— cationofHeatshockproteinsA 12B (HSPAI2B)inratastroeytes．Methods：AstrocytesweretreatedwithLPSatdifferentconeentra— tion(0．)【l，0．1，1，10 g／m1)andatthesameconcentration(1 m1)fordifferenttime(1，2，4，6，8，12，24h)．WithRT— PCR andWesternblotmeasurementofHSPA12B，thelevelsofHSPA12Bgeneandproteinexpressionwereobserved．Intracellularlo— cationofHSPA12Bwasdetectedunderfluorescencemicroscope．Results：HSPA12BmRNA increasedafter1hexposuretoLPS (1 g／m1)，andpeakedat4h．AndtheHSPA12BproteinexpressionwasparalleledwiththelevelsofmRNA．Immunocytochemicalstai— ningindicatedtheexpressionofHSPA12BwaslocatedinthenuclearfollowingLPSchallenge．Conclusion：Bacterialcausativeagent， LPScouldinducetheexpressionofHSPA12BmRNAinratastrocytesattranscriptionandproteinleve1．HSPA12Bservedasaninflam— matoryresponsemoleculeparticipatingintheinflammatoryprocess． [Keywords] Lipopolysaccharide；Astrocytes；HSPA12B HSPA12B是 HSP70家族 的一个新成员，与