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高效液相色谱法测定橄榄叶提取物中橄榄苦苷的含量
维普资讯 表2 各种化疗药物对舌癌细胞周期各时相的影响 .Z/=6, 高效液相色谱法测定橄榄叶提取物中 ± S Tab2 influencesofchemotherapeuticdrugsineachphaseoflingual 橄榄苦苷的含量 carcinomacellcycle.Z/=6 ± ( № 党建章 ,许柏球 ,徐华顺 ,冯丽雄 ,张志安 ,顿晓东 Gl s drags tion/mg1‘。l (1.深圳职业技术学院生物应用T程系,广东 深圳 518055;2.深圳市 力可生物技术有限公司,广东 深圳 518052) 中图分类号:R284 文献标识码:A 文章编号:1001 — - 2494(2006)09—.0711.02 注:与对照组 -[L较,l】P001 Nute:1)P()Olvs -【0 ml 橄榄苦苷 (oleumpein)是一种苯酚类裂环环烯醚 部分,但疗效往往不尽人意,个体疗效差异较大,敏 萜苷,广泛存在于木犀科的木犀榄属植物油橄榄 (洋 感性各异,如何预测各种化疗药物的抗癌效应,合理 橄榄)(OleaeuropaeaL.)和卡岑属植物 日本 白蜡树 的指导临床用药,是肿瘤化疗方案极待解决的问题。 (Fraxinus]apanlcaBlune)等植物叶中以及女贞属植物 本研究应用手术切除的舌癌组织,制备单细胞悬液 女贞 (Ligustrumlucidum Ait)和 日本女贞 (Ligustnun 进行原代肿瘤细胞培养,然后进行各种化疗药物敏 japanicaThumb)等植物果实中。 感性实验,MTr结果表明,紫杉醇、丝裂霉素、5.兀J3 橄榄苦苷的药理作用主要有降血压、抗氧化、抗 种化疗药物对舌癌细胞增殖有明显的抑制作用,而 微生物和抗癌等作用。 顺铂则效果不明显 ,且各种抗癌药间差异较大,因此 近年来橄榄叶提取物在美洲和欧洲用作为膳食 在使用前对其敏感性检测,有针对性个体化治疗,以 补充剂以增强免疫功能,因此国外对提取物中的主要 减少用药的盲 目性 ,可收到事半功倍的效果。MTr 功能成分橄榄苦苷的需求量增加。由于国内生产厂 试剂可被哺乳动物活细胞线粒体中的脱氢酶还原成 商检测橄榄苦苷的方法不同,造成供货商与客户之间 蓝色甲腊颗粒,且 甲腊生成的量与活细胞数量及细 的矛盾。本实验i910定了橄榄叶提取物中的橄榄苦苷, 胞活化状态呈线性关系,该法是一种检测细胞存活 建立了HPLC含量测定方法,为指导橄榄苦苷的生产 的客观指标,被广泛用于抗肿瘤药物的筛选和细胞 以及为其质量标准的制定提供参考。 毒性实验。 1 仪器、药品、试剂 肿瘤是一类细胞周期疾病,细胞周期调控异常与 Agilentl100型高效液相色谱仪:包括 四元泵、 细胞癌变密切相关。笔者应用流式细胞仪测定不同 DAD检测器、柱温箱和手动进样器、HP—A09.01化 的化疗药物对舌癌细胞周期各时相的影响,结果显 学工作站;LR4ooo旋转蒸发仪;橄榄苦苷对照品[Ex— 示,紫杉醇、丝裂霉素、5.FU可明显抑制舌癌细胞的 trasynthese(法国,纯度 98%)];色谱纯甲醇、乙腈 (天 Gl期,cl期细胞增多,s期细胞减少,Ca/M期细胞相 津协和昊鹏色谱科技有限公司);水为重蒸蒸馏水;其 对增多,G期又称细胞分裂前期,是细胞从有丝分裂 余试剂均为国产分析纯。 到DNA复制之前,是制造核蛋白体及糖元合成准备 2 色谱条件 阶段,同时G期也是各种药物作用的靶点,所以控制 色谱柱为 ZORBAXEclipseXDB—Cl8(4.6nl/llx G.期细胞的进程,不能进入 s期,从而使肿瘤细胞增 2501Tlnl,5m),流动相为0.01mol·L
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