化学修饰提高谷氨酰胺转胺酶活性与热稳定性_刘松.pdfVIP

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2017-09-02 发布于天津
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化学修饰提高谷氨酰胺转胺酶活性与热稳定性_刘松.pdf

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化学修饰提高谷氨酰胺转胺酶活性与热稳定性_刘松

研究论文研究论文刘松，等：化学修饰提高谷氨酰胺转胺酶活性与热稳定性化学修饰提高谷氨酰胺转胺酶活性与热稳定性，，，刘松1 2 ，堵国成*1 2 ，陈坚1 2 （江南大学工业生物技术教育部重点实验室，江苏无锡；江南大学生物工程学院，江苏无锡 1. 2 14122 2. 2 14122）摘要：谷氨酰胺转氨酶（EC 2.3.2.13 ，简称TGase ）是一种催化转酰基反应，导致蛋白质分子间发生交联的酶，广泛应用于食品、纺织、皮革、医药等领域。为提高TGase 比活力与热稳定性，作者以邻苯二甲酸酐为修饰剂，对重组吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus ） TGase 分子赖氨酸残基进行化学修饰。确定最佳修饰条件为： 8.0、 0 ℃修饰反应 h 、表面氨基与摩尔 pH 2 2 TGase PA 比为。无胱胺（的竞争性抑制剂）存在时，修饰使比活力提高； 0 1∶2 TGase PA TGase 48.3% 1 胱胺存在时，修饰使热稳定性提高。晶体模拟结构显示，个赖氨酸残 mmol/L PA TGase 31.3% 2 1 基位于S. hygroscopicus TGase 分子表面，其中5 个位于催化活性中心附近区域。表面疏水性分析发现，不同条件的修饰使分子表面疏水度降低 ~21.13% 。因此，可能通过 PA TGase 9.46% PA 改变分子不同区域的疏水性来提高其比活力和热稳定性的。上述结果表明，修饰是一 TGase PA 种改进TGase 酶学性质的有效策略，为其后续的分子改造提供了一定的理论参考。关键词：谷氨酰胺转胺酶；邻苯二甲酸酐；比活力；热稳定性；表面疏水度中图分类号： 814 文献标志码：文章编号： 673— 689 （ 015 ） 1— 135— Q A 1 1 2 1 1 06 Chemical