重组钝顶节旋藻藻蓝蛋白基因在聚球藻中的表达 - 应用与环境生物学报.pdfVIP

2016-04-25 DOI: 10.3724/SP.J.1145.2015.06002 / Chin J Appl Environ Biol 2016 22 ( 2 ) : 0189-0194 应用与环境生物学报 ， 重组钝顶节旋藻藻蓝蛋白基因在聚球藻中的表达* 代易颖 马 红 周兵兵 陈孔翔 兰利琼 卿人韦** 四川大学生命科学学院 成都 610064 摘 要 藻蓝蛋白（Phycocyanin ）具有抗氧化、消炎、抗癌、增强免疫等生理活性和荧光特性. 本研究从钝顶节旋 Arthrospira platensis 7942 Synechococcus sp. PCC 7942 藻（ ）中克隆藻蓝蛋白基因，构建重组藻蓝蛋白并在聚球藻 （ ） PCR α cpcA β cpcB cpcA 5’ 3’ 中表达. 利用 技术克隆钝顶节旋藻藻蓝蛋白 亚基（ ）与 亚基（ ）基因，在 的 端及 端加入编 码 6 × His标签基因，克隆HiscpcA基因，并构建同源重组表达载体pUBCA3D-1. 通过自然转化法将pUBCA3D-1转入 聚球藻中，经筛选鉴定获得了转基因藻株. PCR验证结果表明，目的基因整合到聚球藻基因组中的概率为 86.6%. 转 基因聚球藻在无抗生素筛选条件下连续培养2个月，仍能稳定表达重组CpcA. 以上结果表明，重组钝顶节旋藻藻蓝 蛋白在聚球藻中稳定表达；研究结果为节旋藻cpcA基因改造、重组CpcA进一步分离纯化以及重组藻蓝蛋白的生产 奠定了基础.（图4 表2 参22 ） 关键词 钝顶节旋藻；藻蓝蛋白；表达载体；聚球藻7942 CLC Q786 The expression of recombinant Arthrospira platensis phycocyanin in Synechococcus* ** DAI Yiying, MA Hong, ZHOU Bingbing, CHEN Kongxiang, LAN Liqiong QING Renwei College of Life Sciences, Sichuan University, Chengdu 610064, China Abstract Phycocyanin consists of α subunit and β subunit with fluorescence characteristics and physiological characteristics of antioxidant, anti-cancer and increasing immune activity. This research cloned phycocyanin gene from Arthrospira platensis, and constructed the recombinant phycocyanin gene in Synechococcus sp. PCC 7942. The gene