酪蛋白水解物的酶法修饰优化与抗氧化活性改善 - 农业机械学报.pdfVIP

２０１０年 １月 农 业 机 械 学 报 第 ４１卷 第 １期 ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００１２９８．２０１０．０１．０２７ 酪蛋白水解物的酶法修饰优化与抗氧化活性改善 吴　丹　李铁晶　赵新淮 （东北农业大学乳品科学教育部重点实验室，哈尔滨 １５００３０） 　　【摘要】　利用木瓜蛋白酶对酪蛋白水解，并对所得到的水解物进行类蛋白反应修饰，制备高活性抗氧化肽。 以水解物的游离氨基含量变化为响应值，利用响应面分析法对类蛋白反应条件进行优化，得到适宜条件为：酶添加 量为５００Ｕ／ｇ，温度３０℃，底物质量分数５０％，反应时间５６ｈ。毛细管电泳分析确认，水解物经类蛋白反应修饰后 肽分子组成发生变化。抗氧化活性分析结果表明，所制备的３个修饰产物对３种自由基的清除能力显著提高。 关键词：酪蛋白水解物　抗氧化活性　类蛋白反应　响应面分析 中图分类号：ＴＳ２０１１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１０００１２９８（２０１０）０１０１３９０７ ＥｎｚｙｍａｔｉｃＭｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＣａｓｅｉｎＨｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓｂｙＰｌａｓｔｅｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ ａｎｄＩｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｉｎＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔＡｃｔｉｖｉｔｙ ＷｕＤａｎ　ＬｉＴｉｅｊｉｎｇ　ＺｈａｏＸｉｎｈｕａｉ （ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＤａｉｒｙＳｃｉｅｎｃｅ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ，ＮｏｒｔｈｅａｓｔＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｒｂｉｎ１５００３０，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｃａｓｅｉｎｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓｗｅｒｅｐｒｅｐａｒｅｄｂｙｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓｏｆｃａｓｅｉｎｗｉｔｈｐａｐａｉｎ，ａｎｄｔｈｅｎｍｏｄｉｆｉｅｄｂｙｐａｐａｉｎ ｃａｔａｌｙｚｅｄｐｌａｓｔｅｉｎｒｅａｃｔｉｏｎｔｏｐｒｅｐａｒｅａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｐｅｐｔｉｄｅｓｗｉｔｈｈｉｇｈｅｒａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｒｅｓｐｏｎｓｅｓｕｒｆａｃｅａｎａｌｙｓｉｓ ｗａｓｃｏｎｄｕｃｔｅｄｔｏｏｐｔｉｍｉｚｅｔｈｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆｐｌａｓｔｅｉｎｒｅａｃｔｉｏｎｗｉｔｈｔｈｅｖａｒｉａｔｉｏｎｓｏｆｆｒｅｅａｍｉｎｏｇｒｏｕｐｓｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎｍｉｘｔｕｒｅｕｓｅｄａｓｉｎｄｅｘ．Ｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｂｔａｉｎｅｄｗｅｒｅｔｈａｔｅｎｚｙｍｅａｄｄｉｔｉｏｎｌｅｖｅｌｗａｓ ５００Ｕ／ｇ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ３０℃，ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓｗａｓ５０％ ａｎｄｒｅａｃｔｉｏｎｔｉｍｅｗａｓ５６ｈ． Ｔｈｅａｎａｌｙｓｉｓｒｅｓｕｌｔｓｆｒｏｍｃａｐｉｌｌａｒｙｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓｃｏｎｆｉｒｍｅｄｔｈａｔｔｈｅｐｅｐｔｉｄｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓｏｆｍｏｄｉｆｉｅｄ ｐｒｏｄｕｃｔｓｗｅｒｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｆｒｏｍｔｈａｔｏｆｃａｓｅｉｎｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓ．Ｔｈｅａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｔｈｒｅｅｍｏｄｉｆｉｅｄ ｐｒｏｄｕｃｔｓｗｅｒｅａｌｓｏａｎａｌｙｚｅｄ，ｗｈｉｃｈｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｉｒｓｃａｖｅｎｇｉｎｇａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｆｏｒｔｈｒｅｅｆｒｅｅｒａｄｉｃａｌｓｗｅｒｅ ｅｎｈａｎｃｅｄｏｂｖｉｏｕｓｌｙ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ　Ｃａｓｅｉｎｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓ，Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙ，Ｐｌａｓｔｅｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，Ｒｅｓｐｏｎｓｅｓｕｒｆａｃｅａｎａｌｙｓｉｓ ［４］ 酶水解鹰嘴豆蛋白制备抗氧化肽，胡文琴等 以羟 　　引言