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冷皂化ˉ高效液相色谱法测定乳制品中叶黄素的5
箱43卷 分析化学(FENXIHUAXUE)研究简报 第3期 h•F 0 20|5甲3月 ChineSeJOuma]OfAna]ytiCalChemiStry 404~408 DO1810.11895/j。iSSn.0253ˉ38』l0。140931 } 冷皂化ˉ高效液相色谱法测定乳制品中 叶黄素的5种|||页反式异构体 陈万勤刘柱郑国钢*茅佩卿朱炳棋丁宇畸周赛静 (浙江省食品药品检验研究院,杭州310004) 摘要建立了冷皂化ˉ高效液相色谱法测定乳制品中叶黄素的5种顺反式异构体。』将乳制品进行冷皂化处 理后.经正己烷ˉ石油醚_二氯甲烷(2:2:1’wV)提取’使用YMCC30色谱柱分离’以甲醇和甲基叔丁基醚为 充功相进行梯度洗脱’采用二极管阵列检测器于445nm波长下检测’外标法定量;在O127~5.082lng/L 旭侗内的线性关系良好’相关系数(R2)为O9999’回收率在967%~1022%之间’RSD在4l%~5抖%之 |)‖(′l=6)’检出限为0.010队g/g(S/∧/=3)’定量限为O030‖g/g(S//\/=10)。本方法简单`准确`灾敏度尚’ 适用于乳制品中叶黄素5种异构体的检测° 关键词高效液相色谱法;叶黄素;异构体;乳制品 1引 回 - ˉ ~ 叶黄素(Lulejn)’又名黄体素’是存在于蔬菜`花卉`水果与某些藻类生物中的天然类胡萝卜素。 叶黄素具有良好的预防人体衰老`动脉硬化|l]`抗氧化`抗癌功效[2]以及独特的护眼功能3’4等’在保 健品`化妆品和动禽类饲料等多个领域广泛应用。美国FDA于l995年批准了叶黄素作为食品补充剂 用于食品中’我国2007年批准了叶黄素作为营养强化剂添加到婴幼儿或儿童配方食品中「5°叶黄素 分子结构中含多个共扼碳碳双键结构’由于烯键的存在’叶黄素可以存在多』种几何异构体。叶黄素不 问异构体在生物体内的生物活性也不同’其中全反式构象的生物活性较顺式构象要高很多[6`7。目前 市售的食品中很少有区分叶黄素不同异构体的含量。因此’建立高效的叶黄素顺反异构体的检测方法 具有重要的意义。 目前叶黄素的检测方法主要以高效液相色谱法[8~l0]和液质联用法[1l』l2]为主。由于叶黄素在光和 热的作用下容易发生顺反异构化[l3』l4]’因此样品的所有处理过程需在较低温度和避光条件下进行’避 免全反式叶黄素发生异构化°所以到目前为止’国际市场上也只有全反式叶黄素标准物质在售’尚未 有叶黄素)||页式异构体的标准物质’对顺式异构体进行定量仍然是—个难题。本研究采用全反式叶黄素 作为标准物质’对5种叶黄素异构体进行定量分析’并且对样品的前处理方法进行了研究’采用冷皂 化法迸行样品的前处理’避免叶黄素在高温皂化时叶黄素发生异构化’采用液相色谱法结合YMCC30 色谱柱对叶黄素异构体进行有效分离’准确定量° 2实验部分 b•• 2}.1仪器与试剂 A:ilen|l260高效液相色谱仪’配二极管阵列检测器(美国Agi
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