FH535抑制人肝癌细胞HepG2增殖及cyclin D表达.pdfVIP

中华临床医师杂志(电子版)2012年3月第6卷第 6期 ChinJClinicians(ElectronicEdition)。March15，2012．V01．6，No．6 · 论 著 · FH535抑制人肝癌细胞 HepG2增殖 及 cyclinD表达 李光兵 杨华瑜 毛一雷 孙倩 钟守先 黄洁夫 【摘要】 目的 探讨 B．catenin抑制剂 FH535对人肝癌细胞系HepG2增殖的影响及可能机制。 方法 HepG2细胞分为对照组和FH535用药组，使用改良3一(4，5-二甲基噻唑_2)-2，5一二苯基四氮唑溴盐 比 色法 (MTS)检测 FH535对HepG2细胞增殖的影响，以Westernblot法检测HepG2细胞31-catenin以及 cyclinD 蛋白表达水平，用实时荧光定量聚合酶链式反应 (PCR)检测 HepG2细胞cyclinDmRNA水平。结果 FH535 能够显著抑制 HepG2细胞的增殖 ，呈时间和剂量依赖性。与对照组相比，FH535给药组HepG2细胞内B— catenin蛋白表达无差异。FH535给药组细胞wnt／31一catenin信号通路的靶基因cycliriD的mRNA和蛋白的表 达显著下降，与对照组相比差异有统计学意义(P0．0001)。结论 FH535通过抑制cyclinDmRNA及 cyc— linD蛋白表达而抑制HepG2细胞增殖。 【关键词】 肝肿瘤； B连环素； HepG2细胞系 InhibitoryeffectofFH5350nproliferationandcyelinD expressioninHepG2cellline G眦 一6 ，YANG Hua—yu，MAOYi—lei，SUNQian，ZHONGShou—xian，HUANGJie-fu．DepartmentofLiverSurgery，PekingUnion MedicalCollegeHospital，ChineseAcademyofMedciazSciencesandPUMC，Beijing100073，China Correspondingauthor：MAO Yi—lei，Email：maoy@public3．bta．net．cn 【Abstract】Objective Toexploretheeffectof31-eatenininhibitorFH535onproliferationofHepG2andits mechanism．Methods HepG2cellsweretreatedwithFH535．Cellproliferationwasdeterminedbymodified3-(4，5一 Dimethyhhiazol-2一y1)-2，5-diphenyhetrasoliumbromidecolorimetricassay(MTS)．cyclinDmRNAexpressionwere detemrinedbyrealtimepolymerasechainreaction(RT—PCR)，B—cateninandcyclinD proteinexpressionwere detemr inedbywestern blot．Results Compared with the controlgroup，theproliferation ofHepG2 cellswas significantlydecreasedaftertreatmentwithFH535，inadose-andtime—dependentmanner．cyclinDmRNA andcyclin Dproteinlevelwerebothdown—regulatedinFH535groupcomparedwiththecontrolgroup(P0．0001)，whileB- cateninproteinexpressionwasnotaffected．Conclusions FH535 inhibited theproliferationofHepG2 cells：This mightthroughdown-regulationofcyclinDmRNA andcyclinD protein． 【Keywords】 Liverneoplasms；betaCatenin；HepG2cellline 近年研究发现，wn