纤维堆囊菌发酵产生埃博霉素条件的优化水.pdf

维普资讯 华 南 理工 大 学 学 报 (自然 科 学版 ) 第34卷 第5期 JournalofSouthChinaUniversityofTechnology Vo1．34 NO．5 2006年5月 (NaturalScienceEdition) May 2006 文章编号：1000—565X(2006)05—0048—05 纤维堆囊菌发酵产生埃博霉素条件的优化水 罗立新 汪 薇 陆一鸣 潘 力 萨斯琳 孔俊文 (华南理工大学 生物科学与工程学院，广东 广州510640) 摘 要：埃博霉素是纤维堆囊菌产生的一种具有抗肿瘤活性的次级代谢产物．文中研究 了纤维堆囊菌DSM11999发酵合成埃博霉素的条件．结果表明：采用对数生长期后期的菌 种在 25℃进行发酵，将马铃薯淀粉和胰蛋 白胨分别作为碳源和氮源，添加少量的无机盐 MnC14，EDTA—Fe—Na，K2HPO，ZnC12，CuSO 和生长促进因子丙氨酸，可使埃博霉素的产量 提高22．5％． 关键词：纤维堆囊菌；发酵；埃博霉素；优化 中图分类号：Q815 文献标识码：A 粘细菌(Myxobacteria)是一类高等的原核生物， 1 材料和方法 具有复杂的多细胞行为，是革兰氏阴性细菌，能产生 丰富的生物活性次级代谢产物，而且产物生物活性 1．1 材料 作用的多样性可与著名的链霉菌类群相比拟 ¨J． 1．1．1 菌株与菌株的保藏 纤维堆囊菌DSM11999 纤维堆囊菌(Sorangiumcellulosum)属于粘细菌 菌株购 于 GermanCollectionofMicroorganismsand 的溶纤维素类群，它产生的一类大环内酯类化合物 CellCultures．菌株以VY／2斜面于4cc短期保藏，以 埃博霉素 (Epothilone)具有促微管聚合的活性，是 目 23B3培养基(葡萄糖2g／L，马铃薯淀粉20 L，脱脂 前引起医药界广泛关注的抗癌物质．埃博霉素能与 奶粉 16g／L，EDTA铁钠8g／L，HEPES(N一(2一羟乙 真核细胞中的微管骨架结合，导致染色体分离受阻， 基)哌嗪一N一乙烷磺酸)5 L，XAD16中性吸附树脂 细胞核不能分裂 剖．埃博霉素的作用机制与著名的 2％(体积分数)，用 NaOH调pH值至7．8，0．1MPa 抗癌药物紫杉醇相同，但是比紫杉醇具有更好的水 灭菌20rain于一80cc长期保藏． 溶性，分子质量小，结构简单，来源不受限制，毒性更 1．1．2 种子培养基(G52培养基) 干酵母粉2 L， 小 J，可以通过大规模 的工业发酵进行制备，以降 MgSO ·7H2O1g／L，CaCI ·2HO1g／L，脱脂奶粉 低成本． 2 I，马铃薯淀粉8g／L，无水葡萄糖2 L，EDTA铁 目前已有一些关于纤维堆囊菌株在发酵罐进行 钠8g／L，用 KOH 调 pH值至 7．4，0．1MPa灭菌 发酵合成埃博霉素的实验报道，以及关于影响埃博 20min． 霉素合成的营养控制研究 ，但是埃博霉素产量的 1．1．3 发酵培养基 (1B12培养基) 马铃薯淀粉 不稳定性以及其产量有待于进一步提高的问题仍然 20 L，脱脂奶粉l1g／T，EDTA铁钠8mg／L，用 KOH 是 目前备受关注的焦点．本研究探讨了优化发酵条