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第三章 食物中蛋白质含量的测定
2.消化 先小火炭化,无泡沫后,加大火力,液体变蓝绿透明,继续加热微沸30分钟 消化终点 瓶口不能对着人 盖上小漏斗 45度角 注意细节 2.消化 碳化 泡沫消失 澄清状态 2.消化 3.蒸馏 按要求装好凯氏定氮装置。 按下图连接好蒸馏装置图 加水至2/3体积处,加数滴甲基橙指示剂和硫酸几毫升,使水呈酸性 夹紧螺旋夹 加热蒸汽发生瓶中的水,检查整套装置是否有漏气现象,不能漏气 注意细节 3.蒸馏 将消化液全部转移 到100mL容量瓶中 加10ml硼酸溶液和混合指示剂2~3d 加入NaOH溶液后颜色为深蓝色或褐色 通入蒸汽开始蒸馏 冷凝管下口浸入硼酸溶液中 取5ml消化稀释液沿小玻璃杯移入反应室,少量蒸馏水冲洗,塞紧棒状玻璃塞,向小玻璃杯内加入5mL40%NaOH,提起玻璃塞,使NaOH缓慢流入反应室,立即塞紧玻璃塞,并在小玻璃杯中加水使之密封。 注意细节 3.蒸馏 吸收液变蓝色后继续蒸馏5分钟,将冷凝管尖端提离液面再蒸馏1min,用蒸馏水冲洗冷凝管尖端,取下接收瓶,关闭电源 每次蒸馏完毕后,于反应室中加入适量蒸馏水,捏紧橡皮管以断绝蒸气源,使废液自动吸出。如此反复冲洗三次后,打开反应室下口的螺旋夹,使废液排走,然后可进行下一样品的测定。 取下接收瓶,用0.01mol/L的盐酸标准溶液滴定至终点。 滴定前 滴定终点 同时做一试剂空白实验,记录空白滴定消耗盐酸的体积。 【计算】 式中:V1──滴定空白液消耗0.01N盐酸量(mL) V2──滴定样品蒸馏液消耗0.01N盐酸量(mL) V3──蒸馏用样品稀释液量(mL) W ──样品取样量(g) N ──盐酸溶液的当量浓度 0.014──每ml1N盐酸标准液相当氮g数 % 【注意事项】 1.消化要在通风橱内进行。烧瓶应洗净干燥,移入样品时防止粘在颈壁。消化瓶在电热架上最好成45°斜角。 2.消化时附在壁上的样品可用摇动或以少量硫酸冲下,保证样品全部与硫酸接触。 3.蒸馏时向反应室内加NaOH动作要快。玻璃塞塞严并立即用少量水密封,以免氨的逸出。 4.严禁酸碱污染硼酸吸收液及冲洗用水。 5.蒸馏时,火力应均匀,不得中途停火。每次蒸馏液体积基本保持在30ml左右。 6.在测定前,应先用标准(NH4)2SO4 做氮回收率的测定,借以验证所用仪器、试剂及操作条件的可靠性。氮回收率应在95%~105%之间。 营养与食品卫生学教研室 一、概述 1、食品中的蛋白质含量及测定意义 2、蛋白质系数 3、蛋白质分析方法 二、凯氏定氮法(重点) 1、蛋白质系数是如何计算出来的? 2、蛋白质的测定方法有哪些?国家标准是哪一种方法? 3、为什么说用凯氏定氮法测出的是粗蛋白的含量? 蛋白质是以氨基酸为最小构成单元的大分子的含氮化合物,它是由20种氨基酸通过酰氨键以一定方式结合,并具有一定的空间结构。 蛋白质是遗传信息的具体表达,是生命的表现与存在形式。 1.蛋白质是生命的物质基础,是构成生物体细胞组织的重要成分,是生物体发育及修补组织的原料,一切有生命的活体都含有不同类型的蛋白质。 2.体的酸碱平衡、水平衡的维持; 3.遗传信息的表达方式; 4.物质的代谢及运转都与蛋白质有关(酶)。 5.人及动物只能从食品得到蛋白质及其分解产物,来构成自身的蛋白质,是人体重要的营养物质 6.膳食指导的重要(营养)指标。 7.食品生产的重要工艺指标。 动物食物品种 蛋白质含量(%) 人 乳 1.5 牛 乳 3.2~3.3 全脂奶粉 22~25 脱脂奶粉 34~38 猪 肉 9.5 牛 肉 干 81~90 全 蛋 粉 35 脱脂蛋粉 77 常见食物中蛋白质的含量 植物食物品种 蛋白质含量(%) 大 米 5.2~7.6 白 面 9.8~13.5 玉 米 面 7.0~9.4 黄 豆 33~42 花 生 25~38
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