三疣梭子蟹血淋巴免疫功能的初步研究.pdfVIP

第27卷第4期 水 产 科 学 V01．27 No．4 2o08年 4月 FISHERIES SCIENCE ADr．2008 三疣梭子蟹血淋巴免疫功能的初步研究 李长红，金 珊 (宁波大学生命科学与生物工程学院，应用海洋生物技术教育部重点实验室，浙江 宁波 315211) 摘 要：利用API ZYM试剂盒和酶活力测试盒检测了三疣梭子蟹血细胞及血清中的19种酶类及血清 中溶菌酶、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、超氧化物歧化酶和过氧化物酶的活性。试验结果表明，在雄蟹血 清和血细胞中均检测到19种酶，在雌蟹血清和血细胞中分别检测到18种和16种。碱性磷酸酶和酸 性磷酸酶的活性很低。在此基础上，研究了三疣梭子蟹血清和血细胞溶解物(HLS)对溶藻弧菌的抗菌 活力，结果显示血清样品对溶藻弧菌的抗菌活力较强，但其体外作用的持续时间较短；而血细胞溶菌酶 对溶藻弧菌的抗菌活力较弱。 关键词：三疣梭子蟹；血细胞；血清；抗菌活力；酶 中图分类号：$968．25 文献标识码：A 文章编号：1003．1111(2008)04-0163-04 三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)属甲壳 三疣梭子蟹购于浙江宁波水产市场，共3O只， 纲、十足目、梭子蟹科、梭子蟹属，主要分布于中国、 蟹体健康，体质量100—160 g，壳长l2—14 em，于 日本及朝鲜等海域¨J。由于其肉味鲜美、营养丰 60 am×50 am×40 am的玻璃缸中暂养2 d后进行 富，因此深受广大消费者的青睐，也是重要的出口 试验。暂养水体为过滤海水，水温(25±1)℃，盐 创汇品种。据不完全统计，目前浙江省三疣梭子蟹 度l7．5±1，pH 8．0±0．1，不投饵，且不间断充气。 单养或混养的面积已超过4 000 hm ，年产量约2．5 每13及时吸去排泄物，换水50％。 ×10 t。但是，随着养殖规模的扩大，生产水平和 1．1．2 试剂 集约化程度的不断提高，三疣梭子蟹病害频繁发生 抗凝剂I[葡萄糖2O g／L，柠檬酸钠8 g／L， 且13趋严重，新的疾病也不断出现，严重阻碍了三 EDTA 3．36 g／L，吐温8O(Tween一8O)100 l／，L]， 疣梭子蟹养殖业健康发展。因此，如何有效提高三 抗凝剂Ⅱ[氯化钠450 mmol／L，氯化钾10 mmol／L， 疣梭子蟹的免疫功能和抗病能力，避免或减少由于 EDTA·N 10 mmol／L。HEPES(4一羟乙基哌嗪乙 用药所带来的负面影响，是目前三疣梭子蟹养殖中 磺)10 mmol／L]，0．3％L—DOPA(L一二羟苯丙氨 亟待解决的问题。 酸，Sigma)，缓冲液I(0．01 mo~L--甲胂酸钠，0．1 由于甲壳动物缺乏像脊椎动物那样的特异性 mol／，L柠檬酸钠，0．1 mol／L EDTA·Na2，0．25 mol／L 免疫系统，其免疫防御机制主要依赖于血细胞的吞 蔗糖，pH 6．8)，缓冲液Ⅱ(0．01 mol／，L二甲胂酸 噬、包囊以及血淋巴中的一些酶和免疫因子的杀 钠，5 mmol／L EDTA·Na2，0．25 mol／，L蔗糖，pH 菌、抗菌作用来完成 J，因此，了解甲壳动物血淋巴 7．O)，缓冲液Ⅲ(0．01 mol／，L二甲胂酸钠，5 mmol／， 的免疫功能，有助于寻找增强抗病力的方法，预防 L氯化钙，1．5 mol／L氯化钠，1．5 mol／L蔗糖，pH 疾病。目前有关三疣梭子蟹血淋巴免疫功能的相 7．O)