hPOT1 RNA干扰对人胃癌细胞株BGC-823端粒长度和hTERT表达的影响.pdfVIP

胃肠病学 2008年第 13卷第 10期 · 607 hPOT1RNA干扰对人 胃癌细胞株 BGC一823 端粒长度和 hTERT表达的影响 宁晓燕 房殿春 贴 君 程永波 张汝铜 王洪斌 杨柳芹 第三军医大学西南医院全军消化病研究所 4【00038) 背景：人端粒保护蛋 白1(bPOT1)的主要作用为保护端粒和调节端粒长度。目的：探讨 hPOT1在人 胃癌细胞 中对 端粒长度的调节作用及其可能机制。方法 ：以RNA干扰 (RNAi)技术抑制人 胃癌细胞株 BGC一823中hPOT1的表达 ， 以实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测细胞端粒长度，以半定量逆转录聚合酶链反应 (RT—PCR)检测人端粒酶逆 转录酶(hTERT)mRNA表达。结果：以RNAi技术抑制 hPOT1表达后 ，BGC一823细胞端粒长度 明显缩短 ，反映端粒相 对长度的T，s值显著小于亲本BGC一823细胞组和阴性对照组 (1．383_+0．091对 2．758~0．647和 3．043_+0．548，P0．05)， 亲本细胞组与阴性对照组之间则无 明显差异 。hPOT1RNAi组细胞 hTERTmRNA表达亦明显下调。结论 ：在人 胃癌 细胞 中．hPOT1能正性调节端粒长度 ；在 hPOT1下调引起端粒缩短的环节 中，hTERT表达下降可能起一定作用。 关键词 端粒保护蛋 白1： RNA，小分子干扰； 端粒长度； 端粒酶逆转录酶； 细胞系，肿瘤 AlterationsofTelomereLength and hTERT Expression in Human GastricCancer CellLineBGC-823with SilencingofhPOT1byRNA Interference NINGXiaoyan，FANGDianchun, TIEJun， CHENGYongbo， ZHANG Rugang,WANGHongbin，YANGLiuqin．InstituteofDigestiveDiseaseofChinesePLA，SouthwestHospital,TheThird MilitaryMedicalUniversity,Chongqing(400038) Correspondenceto：FANG Dianchun，Email：fangdianchun@hotmail．con Background： Protection oftelomereandregulation oftelomere length are thetwomain functionsofhuman protectionoftelomeres1(hPOT1)protein．Aims：ToinvestigatetheeffectofhPOT1onregulationoftelomerelengthin humangastriccancercellsanditspotentialmechanism．Methods：ExpressionofhPOT1inhumangastriccancercel1line BGC一823wasinhibitedbyRNAinterference rRNAi)． TelomerelengthofBGC一823cellswasmeasuredbyreal—time fluorescentquantitativepolymerasechainreaction (PCR)， andexpressionofhumantelomerasereversetranscriptase (hTERT)mRNAwasdeterminedbysemi—quantitativereversetranscriptasepolymerasechainreactionfRT—PCR)．Results： TelomerelengthofBGC·823cellsinhPOT1RNAigroupwassignificantlyshorterthanthatofparentBGC一823cells