HSP47 siRNA重组质粒对裸鼠瘢痕疙瘩模型的体内干预研究.pdfVIP

徐州医学院学报 ACTA ACADEMIAE MEDICINAE XUZHOU 2008，28(10) HSP47siRNA重组质粒对裸 鼠瘢痕疙瘩模型的体 内干预研究 金培生，张爱君，陶常波，李雪扬 (徐州医学院附属医院整形外科 ，江苏 徐州 221002) 摘要：目的 利用RNA干扰 (RNAi)技术通过热休克蛋白47(HSP47)siRNA重组质粒和脂质体的混合液对 裸鼠瘢痕疙瘩模型的体内干预，分析HSP47基因在瘢痕疙瘩生成中的意义。方法 构建裸 鼠瘢痕疙瘩动物模 型，第 16天实验组(n：8)在瘢痕疙瘩内注射HSP47siRNA重组质粒、脂质体混合液0．25ml，对照组(n=8)裸鼠 瘢痕疙瘩内注射PBS液0．25ml。所有动物原笼饲养 ，7天回收标本，分别作mRNA水平、胶原蛋白水平检测及免 疫组化染色。结果 实验组体内干预后 ，HSP47的基因表达水平均较对照组明显下降(P0．01)，胶原的表达水 平明显低于对照组(P0．01)。结论 HSP47基因能促进瘢痕疙瘩生成，其可能成为抑制瘢痕疙瘩的新靶点。 关键词：瘢痕疙瘩；RNA干扰；热休克蛋白47(HSP47)；体内干预；动物模型；裸鼠 中图分类号：R622 文献标志码：A 文章编号：1000—2065(2008)10—0644—04 TheinvivointerventionbytherecombinantplasmidofHSP47siRNA againstnudemicekeloidmodel JINPeisheng，ZHANGAijun，TAOChangbo，LIXueyang (DepartmentofPlasticSurgery，AffiliatedHospitalofXuzhouMedicalCollage，Xuzhou，Jiangsu221002，China) Abstract：Objective Toanalyzethesignificanceofheatshockprotein47(HSP47)geneinkeloidformationby theinvivointerventionwithRNAitechnologyandtherecombinantplasmidofHSP47siRNAagainstHSP47innudemice keloidmode1．Methods RNAimixture(0．25m1)wasinjectedintothekeloidinexperimentgroupandPBS(0．25m1) wasinjectedintothekeloidincontrolgrouponthe16thdayafterthemodelswereestablished．Followinginvivointerven— tion，thespecimenswereobservedandharvestedonthe7thdayfordeterminationofmRNA andcollagenlevelsandim— munohistochemicalstaining．Results Afterinvivointervention，theexpressionofHSP47generemarkablydecreasedin contrasttothecontrolrgoup(P0．01)，andtheexpressionofcollagenwasmarkedlylowerthanthecontrolrgoup(P 0．01)．Conclusion TheexpressionofHSP47genepromotestheformationofkeloid，whichprovidesanewtargetto treatmentofkeloid． Keywords：keloid；RNA ． interference；heatshockprotein47(HSP47)；invivointervention；anima