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HSP47 siRNA重组质粒对裸鼠瘢痕疙瘩模型的体内干预研究.pdf

徐州医学院学报 ACTA ACADEMIAE MEDICINAE XUZHOU 2008,28(10) HSP47siRNA重组质粒对裸 鼠瘢痕疙瘩模型的体 内干预研究 金培生,张爱君,陶常波,李雪扬 (徐州医学院附属医院整形外科 ,江苏 徐州 221002) 摘要:目的 利用RNA干扰 (RNAi)技术通过热休克蛋白47(HSP47)siRNA重组质粒和脂质体的混合液对 裸鼠瘢痕疙瘩模型的体内干预,分析HSP47基因在瘢痕疙瘩生成中的意义。方法 构建裸 鼠瘢痕疙瘩动物模 型,第 16天实验组(n:8)在瘢痕疙瘩内注射HSP47siRNA重组质粒、脂质体混合液0.25ml,对照组(n=8)裸鼠 瘢痕疙瘩内注射PBS液0.25ml。所有动物原笼饲养 ,7天回收标本,分别作mRNA水平、胶原蛋白水平检测及免 疫组化染色。结果 实验组体内干预后 ,HSP47的基因表达水平均较对照组明显下降(P0.01),胶原的表达水 平明显低于对照组(P0.01)。结论 HSP47基因能促进瘢痕疙瘩生成,其可能成为抑制瘢痕疙瘩的新靶点。 关键词:瘢痕疙瘩;RNA干扰;热休克蛋白47(HSP47);体内干预;动物模型;裸鼠 中图分类号:R622 文献标志码:A 文章编号:1000—2065(2008)10—0644—04 TheinvivointerventionbytherecombinantplasmidofHSP47siRNA againstnudemicekeloidmodel JINPeisheng,ZHANGAijun,TAOChangbo,LIXueyang (DepartmentofPlasticSurgery,AffiliatedHospitalofXuzhouMedicalCollage,Xuzhou,Jiangsu221002,China) Abstract:Objective Toanalyzethesignificanceofheatshockprotein47(HSP47)geneinkeloidformationby theinvivointerventionwithRNAitechnologyandtherecombinantplasmidofHSP47siRNAagainstHSP47innudemice keloidmode1.Methods RNAimixture(0.25m1)wasinjectedintothekeloidinexperimentgroupandPBS(0.25m1) wasinjectedintothekeloidincontrolgrouponthe16thdayafterthemodelswereestablished.Followinginvivointerven— tion,thespecimenswereobservedandharvestedonthe7thdayfordeterminationofmRNA andcollagenlevelsandim— munohistochemicalstaining.Results Afterinvivointervention,theexpressionofHSP47generemarkablydecreasedin contrasttothecontrolrgoup(P0.01),andtheexpressionofcollagenwasmarkedlylowerthanthecontrolrgoup(P 0.01).Conclusion TheexpressionofHSP47genepromotestheformationofkeloid,whichprovidesanewtargetto treatmentofkeloid. Keywords:keloid;RNA . interference;heatshockprotein47(HSP47);invivointervention;anima

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