基于神经内分泌免疫网络学说探讨新风胶囊治疗类风湿.docVIP

　　基于神经内分泌免疫网络学说探讨新风胶囊治疗类风湿 【摘要】 目的从神经内分泌免疫(NEI)网络角度探讨新风胶囊治疗类风湿关节炎的量效关系，为探讨该药的作用机制及寻求更安全有效的临床用药提供实验依据。方法以AA大鼠为研究模型，分为新风胶囊(XFC)低、中、高剂量组、甲氨蝶呤(MTX)组、雷公藤多苷片(TPT)组及模型组，分组处理30 d后，采用ELISA法检测各组大鼠血清5-HT，DA，ACTH，CORT，TNF-α，IL-10水平，进行统计学分析。结果①XFC各治疗组比较，中剂量组大鼠体重上升最为明显，与正常组无明显差异 (Pgt;0.05);②XFC各治疗组均能不同程度的降低AA大鼠血清5-HT，ACTH，CORT，TNF-α，升高IL-1水平(Plt;0.05或Plt;0.01)，并呈现一定的量效关系。结论XFC中剂量组在维持大鼠体重稳定增长的同时仍能有效调节NEI网络紊乱，体现了中医“扶正祛邪，整体调节”的优势，是临床最佳的选择。 【关键词】 类风湿关节炎;神经内分泌免疫 　类风湿关节炎(RA)是以对称性多关节炎为主要表现的慢性系统性自身免疫性疾病，单纯从免疫学角度难以阐释RA的发病机制和病变特点，近年来神经内分泌免疫(neuron-endocrine-immune，NEI)网络途径在RA的发病机制中越来越受到重视。虽然现代医学首先提出神经内分泌免疫网络的概念，但一直缺乏调节这一网络的有效手段，而单味中药或中药复方进入机体后能够多靶点、多环节、多层次、多途径发挥作用，对神经内分泌免疫网络能起到很好的良性调节作用。新风胶囊是在我院刘健教授“脾虚致痹”理论指导下，在多年临床经验基础上形成的中药复方制剂，具有健脾化湿通络之效。前期研究表明，新风胶囊能有效改善RA患者临床症状和炎症指标，显著改善患者的整体机能，且未见明显毒副作用。本研究拟从NEI网络角度探讨新风胶囊的量效关系，为进一步探讨该药的作用机制及寻求更安全有效的临床用药提供实验依据。 　　1材料 　　1.1动物清洁级TX)：2.5 mg/片,由中国信谊药厂生产;弗氏完全佐剂(Freunds plete adjuvant，CFA)由美国SIGMA公司提供。大鼠血清5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(CORT)、TNF-α、IL-10酶联免疫检测试剂盒均由美国R∝D公司出品。 　　1.3仪器TECAN M8/4R洗板机，TECAN A-5082酶标定量测定仪，HH-TX组、TPT组及模型对照组，当天开始给药。各组的给药量如下：①XFC低剂量组：将XFC去除胶囊壳研成细末，加生理盐水制成混悬液(每毫升含药量为0.3g)，按0.5ml/100g的剂量灌胃，1次/d，剂量相当于临床用量的5倍;②XFC中剂量组：将XFC混悬液按1ml/100g的剂量灌胃，1次/d，剂量相当于临床用量的10倍;③XFC高剂量组：将XFC混悬液2ml/100g的剂量灌胃，1次/d，剂量相当于临床用量的20倍;④MTX组：将MTX研成细末，加生理盐水制成混悬液(每毫升含MTX0.3 mg)，按1 ml/100g的剂量灌胃，每周1次，未给药的实验日，给予生理盐水灌胃，1 ml/100 g，每天1次;⑤TPT组：将TPT研成细末，加生理盐水制成混悬液(每毫升含TPT1 mg)，按1 ml/100 g的剂量灌胃，每天1次;⑥正常对照组及模型对照组予生理盐水灌胃，1 ml/100 g，1次/d。各组疗程均为30 d。 　　2.2足跖肿胀度分别在造模前1天、致炎后每3天、给药后每3天测量各组大鼠的右后足跖的容积,计算各组大鼠足跖肿胀度[1]。肿胀度E(%)=(Vt-Vn)/Vn×100%( Vn、Vt分别代表用致炎剂前后足跖容积值)。 　　2.3关节炎指数(AI)的计算致炎后第12天开始观察并记录全身关节病变程度,每3天1次。全身病变按5级评分法评价,根据未注射佐剂的其余3只肢体的病变程度累积积分,计算出AI[2]。0分:无红肿;1分:小趾关节红肿;2分:趾关节和足跖肿胀;3分:踝关节以下的足爪肿胀;4分:包括踝关节在内的全部足爪肿胀。把各个关节的积分累计起来,即为每只大鼠的AI。 　　2.4指标检测造模第49天，各组大鼠用10%水合氯醛(0.4 ml/100 g)按大鼠体重腹腔注射麻醉。腹主动脉取血，分离血清，置于-20℃冰箱保存待测;具体操作按试剂盒说明书进行，由专业人员一次检测。TECAN A-5082型酶标仪读出OD值后，按曲线拟合软件Curve Expert 1.3计算出浓度值。 　　2.5统计分析实验数据以±s表示，应用SPSS 11.0 软件行单因素方差分析(One-Way ANOVA)及相关性分析。 　　3结果 　　3.1各组大鼠体质量、足趾肿胀度、