杀菌剂抑霉唑人工抗原的合成和鉴定-中柑所在线.pdf

184 2010, Vol. 31, No. 13 食品科学 ※生物工程 杀菌剂抑霉唑人工抗原的合成和鉴定 1,2 ,3 2 2 1, 3 , 2 周映霞 ，张丽杰 ，潘家荣 ，焦必宁 * ，王 磊 ( 1.西南大学食品科学学院，重庆 4007 16 ；2 . 中国农业科学院农产品加工研究所，北京 100 193 ； 3.中国农业科学院柑桔研究所/ 西南大学柑桔研究所，重庆 4007 12) 摘 要：以咪唑乙醇为原料，与6- 溴己酸乙酯发生取代反应后再经水解反应合成抑霉唑半抗原(6-[1-(2,4- 二氯苯基)- 1 2-( 1- 咪唑基) 乙氧基] 己酸) 。产物经薄层层析和 H-N MR 鉴定后，采用活化酯法分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清白蛋 白(OVA)偶联得到免疫原(HIA-BSA)和包被原(HIA-OVA) ，紫外光谱分析法计算得其偶联比分别为13 :1 和7 :1，初 步说明人工抗原合成成功。通过免疫动物获得效价为1:64000 的抗体，采用间接竞争ELISA 法测定抗体的IC50 值为 1.76 μg/m L ，从而进一步证明人工抗原合成成功，所得的抗体可用于ELI SA 检测试剂盒的研制。 关键词：抑霉唑；半抗原；人工抗原；合成；鉴定 Synthesis and Identification of Imazalil Antigen 1,2,3 2 2 1,3, 2 ZHOU Ying-xia ，ZHANG Li-j ie ，PAN Jia-ron g ，JIA O Bi-nin g * ，WANG Lei (1. College of Food Science, Southwest University , Chongqing 4007 16, China；2. Institute of Agro-Food Sciences and Technology, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beij ing 100 193, China.；3. Citrus Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences/Citrus Research Institute, Southwest University, Chongqing 4007 12, China) Abstract ：In this study, imazalil (6-[1-(2,4-dichloro-phenyl)-2-(1-imidazolyl) ethoxy] hexanoic acid) was synthesized via substitution reaction between imidazole ethanol and 6-bromo-ethyl followed by hydrolysis reaction to provide a hapten. The synthesized product was identified by thin-layer chromatography (TLC) and 1H-NMR. The hapten was conjugated with bovine serum albumin (BSA) and ovalbumin (OVA) to obtain artificial immune antigen and arti