BH3类似物对乳腺癌细胞的促凋亡作用.pdfVIP

第 54卷 第 1期 复 旦 学报 (自然科学版) Vo1．54No．1 2015年 2月 Journa] FudanUniversity(NaturalScience) Feb．2015 文章编号 ：0427—7104(2015)O1—0008—08 BH3类似物对乳腺癌细胞的促凋亡作用 蔡 晨 ，刘婷婷 ，张永凤。 (1．中国海洋大学 海洋生命学院，青岛266003；2．上海交通大学 医学院健康科学研究所，上海 200031 3．中国科学院 上海生命科学研究院 上海交通大学医学院健康科学研究所，上海 200031) 摘 要：通过查找NCBI的Gene数据库，发现Bcl-2家族抗凋亡成员的mRNA在大部分乳腺癌细胞系中高表 达．根据以往文献报道，Bcl一2家族抗凋亡成员的高表达能够促进肿瘤的生长．BH3类似物是一类针对Bcl一2家 族抗凋亡成员的新型靶向抑制剂．据此，在 7种乳腺癌细胞系中测试了3种BH3类似物对细胞增殖的影响．在 两种细胞系中通过克隆形成实验和TUNEL实验研究了BH3类似物对单个肿瘤细胞增殖和细胞群体凋亡的影 响．结果表明，ABT-737对大部分乳腺癌细胞系有明显的生长抑制作用 ；ABT一199对大部分乳腺癌细胞系有一 定抑制作用；Tw-37对两种乳腺癌细胞系有较强抑制作用，这些抑制作用是通过细胞凋亡产生的．Bcl一2家族抗 凋亡成员对于T47D和BT-549细胞系的存活不是非常重要．联合用药实验表明ABT-737在BT-549和T47D 细胞系中可以增强阿霉素和紫杉醇的作用．综上所述，BH3类似物可以通过细胞凋亡的途径引起乳腺癌细胞的 死亡，同时BcI一2家族抗凋亡成员可能可以成为治疗乳腺癌的新靶点． 关键词：乳腺癌 ；Bcl一2家族抗凋亡成员；细胞凋亡；BH3类似物；靶向治疗 中图分类号：R963 文献标志码 ：A 大量研究表明，Bcl一2蛋 白家族是细胞程序性死亡的中心调控因子．该家族包括 3类蛋 白，分别是： (1)含有多个 BH结构域的抗凋亡蛋白，包含Bcl一2，Bcl-xl，Bcl—w，Mcl一1等；(2)含有多个BH结构域的 促凋亡蛋白，包含Bax，Bad等；(3)只含有 BH3结构域的促凋亡蛋 白，包含 Bik，Bim，Bid，Puma，Noxa 等_ll_．鉴于多种类型人类恶性肿瘤，尤其是乳腺癌细胞广泛存在抗凋亡 Bcl-2家族成员的高表达，所以 Bcl～2家族中的抗凋亡成员已经被视为治疗恶性肿瘤的重要分子靶点． 2005年，TilmanOltersdorf等人合成了BH3类似物ABT一737，其不仅能结合并抑制Bcl一2，Bcl—xl和 Bcl—w(EC。分别为 30．3，78．7nmol／L和 197．8nmot／L)，而且对部分淋巴癌和小细胞肺癌细胞系有 良 好的杀伤效果 ．2006年，Wang等根据棉子酚的结构改造合成了针对B2，Bcbxl和 Mcbl的BH3 类似物 Tw一37，K 分别为0．29，1．11mol／L和0．26z／mol／L6『。]．2013年，Souers等合成了选择性抑制 Bcl一2的BH3类似物ABT-199(IC；。do．Olnmol／I)，并证实其对部分 白血病细胞和雌激素受体阳性乳 腺癌细胞有较好的凋亡诱导作用．与ABT-737相 比，ABT-199不会诱发血小板减少、子宫内膜炎等副 作用 ． 本研究通过评价不同BH3类似物对乳腺癌细胞的生长抑制和凋亡诱导作用，初步证实了不同的 Bcl一2家族抗凋亡成员在维持乳腺癌细胞存活中的作用，从而为使用 BH3类似物靶向治疗乳腺癌提供了 实验依据． 1 材料与方法 1。1 材料 乳腺癌细胞株 ：MDA—MB-231，MDA_M 435，MDA—MB_468，MCF-7，HBL-100，BT一549，T47D(均 收稿 日期：2014—04—18 基金项 目：国家 自然科学基金面上项 目 作者简介：蔡 晨 (1989～)，男 ，硕士研究生；张永凤，女，助理研究员，通讯联系人，Dmail：zhangyongfeng@sibs． 第 1期 蔡 晨等：BH3类似物对乳腺癌细胞的促凋亡作用