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液相色谱基础知识 ©2012 Waters Corporation 1 什么是色谱? 色谱法的简称(又叫色层法,层析法),其本质是一种分 离分析方法 常见的分离方法 —蒸馏 —离心 —电泳 —过滤 —超滤 色谱 — 目前最有效的分离方法 ©2012 Waters Corporation 2 色谱法简介 色谱法(Chromatography)溯源 — 100多年前俄国植物学家Tswett(茨维特)分离植物色 素时采用的实验方法 —他将植物色素的石油醚提取液倒入装有碳酸钙的直立玻 璃管,再加入石油醚使其自由流下,结果色素中各组份互 相分离形成各种不同颜色的谱带 —Tswett用希腊语chroma(色)和graphos(谱)描述 他的实验方法，即现在的Chromatography(色谱法) ©2012 Waters Corporation 3 Tswett 的实验 一根长玻璃管填充碳酸钙的 颗粒 将碾碎之植物叶片的提取液 灌入柱中 随着石油醚提取液向下流过 柱子，现出展宽的色带 分离出不同的化合物 Chromato - 颜色 Graphy - 图像 注: Tswett：俄文( цвет)的意思是颜色 ©2012 Waters Corporation 4 色谱法简介 色谱法是一种现代的分离方法 -不单是分离有色物质 -不单是吸附机理 1906年正式命名(见诸文献) 20世纪30年代开始广泛研究和应用 高效液相色谱法的广泛应用始于20世纪70年代 ©2012 Waters Corporation 5 色谱法原理 色谱法的原理 —是利用混合物中各组份在不同的两相中溶解,分配,吸附 等化学作用性能的差异,当两相作相对运动时,使各组分在 两相中反复多次受到上述各作用力而达到相互分离 —两相中有一相是固定的,叫作固定相(Stationary Phase),有一相是流动的,称为流动相(Mobile Phase),流 动相又叫洗脱剂,溶剂 相(Phase): —物理化学术语,特指在某一系统中,具有相同成分及相同 物理、化学性质的均匀物质部分。各相之间有明显可分的 界面 ©2012 Waters Corporation 6 色谱法原理 分离是一个 物理过程。 固定相(Stationary Phase) 流动相(Mobile Phase) 进样 (Injection) 洗