ATP发光检测试剂盒.PDFVIP

威格拉斯生物技术（北京）有限公司 ATP发光检测试剂盒 (ATP-Lite Assay Kit) 产品说明： ATP ，是生命体最基本的能量分子，一种通用的能量“货币”。ATP参与多种酶促 反应，维持正常的生命活动。通过ATP检测，可以间接定量测定细菌、细胞的数量 和活性状态，了解体外ATP参与的酶促反应的进程，在生物检定和生命科学研究中 有广泛的应用。本试剂盒采用生物发光(bioluminescent)法，依据荧光素酶(luciferase) 催化底物荧光素的转化，高效利用ATP 的能量，发射出光子。萤火虫荧光素酶(Firefly luciferase)催化的发光反应，与ATP浓度具有很好的线性依赖关系和极高的敏感性， -13 mol 。本试剂盒采用优化的酶反应体系，使发光反应持续 ATP 的检测灵敏度达到10 数十分钟，以便于手工操作多个样品。操作简便，可快速获得结果。 产品内容与储存方法： 名称 数量 保存条件 100x Lysis Buffer (细胞裂解液) 1 ml -20℃ ATP Assay Buffer (反应缓冲液) 10 ml -20℃ Luciferin 0.5 ml -20℃ Firefly luciferase 1 ml -20℃ ATP (1 mM) 0.5 ml -20℃ 可作200次以上ATP检测。低温运输，-20℃或-80℃避光保存。有效期6个月。 所需其它试剂： 使用者需准备PBS 、双蒸水等。 操作方法： 样品准备： 对于细胞或微生物样品，应首先提取ATP 。本试剂盒提供培养哺乳细胞的ATP提取方 法如下。其它标本来源的ATP提取，一般可用三氯乙酸的提取方法，或参照文献一些 有效提取方法进行。对体外酶促反应样品，一般可直接用双蒸水稀释后进行检测。样 品中ATP含量应稀释到0.1 mM一下，以保证在测定的线性范围内。 培养哺乳细胞样品准备： 1) 配制裂解液：临用前，取适量100x Lysis Buffer (ULB)，用双蒸水稀释至1xLB，混 匀。1xLB可长期冻存于-20℃。 2) 细胞清洗：倾去培养板/皿中的培养液，加入足量PBS，轻轻洗涤细胞。完全倾去 洗涤液。 3) 细胞裂解：在孔/皿中加入足量1xLB，混匀。培养板可在微型振荡器上震荡5~10 min ；培养皿可直接用细胞刮刀刮下细胞，将细胞悬液移入1.5 ml离心管，在涡旋振荡 器上充分混悬震荡30秒。裂解细胞悬液可直接用于发光测定，也可离心30秒，取 上清做发光测定。裂解细胞含量较多时，可将样品用双蒸水稀释，以保证在测定 电话：（010 （010 传真：（010 网址： 电子邮件：runon@ 威格拉斯生物技术（北京）有限公司 ATP 的线性范围内。 配制发光反应液： 测定前，在室温待ATP Assay Buffer和Luciferin溶化，混匀（注意避光）。按20/1 比例用 ATP assay Buffer稀释Luciferin ，再加入1/10体积的Luciferase ，配制所需体积的Assay Reagent （注意避光），置冰上